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敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性敘利亞倉鼠的皮膚組織。2002年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
1,2-Bis[Bis[3,5-Bis(Trimethylsilyl)Phenyl]Phosphino]Benzene 分子式: 分子量: 英文名稱: 1,2-Bis[Bis[3,5-Bis (Trimethylsilyl) Phenyl]Phosphino]Benzene CAS號: 1203710-21-7
2-氯-4-硝基苯-a-L-巖藻糖苷 分子式: 319.7 分子量: C12H14ClNO7 英文名稱: 2- -4- -a-L- fucoside nitrobenzene chloride CAS號: 157843-41-9
L-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽 分子式: 181.66 分子量: C7H15NO2·HCl 英文名稱: L- alanine tert butyl ester hydrochloride CAS號: 13404-22-3
鈣羧酸指示劑 分子式: 438.41 分子量: C21H14N2NaO7S 英文名稱: Calcium carboxylic acid indicator CAS號: 3737-95-9
蘇丹II 分子式: 276.33 分子量: C18H16N2O 英文名稱: Sultan II CAS號: 3118-97-6
酸性紅14 分子式: 502.43 分子量: C20H12N2Na2O7S2 英文名稱: Acid red 14 CAS號: 3567-69-9
溴酚紅 分子式: 512.17 分子量: C19H12Br2O5S 英文名稱: Dibromophenol CAS號: 2800-80-8
乙酸丙烯酯 分子式: 分子量: 英文名稱: Acetic acid acrylic ester CAS號:
丙稀酰胺 分子式: 分子量: CH2=CHCONH2 英文名稱: Expeviment CAS號:
N-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸(ADA) 分子式: 190.15 分子量: C6H10N2O5 英文名稱: N- (2-) -2- two acetic acid (ADA) CAS號: 26239-55-4 陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm) 120658B-1 1個
25g 葡聚糖凝膠 G-10
20 次 包涵體微量純化試劑盒
2g Tocopherol( 抗氧化劑 )
5000U S1 核酸酶
U0126(MEK1/2 抑制劑 ) 23-0810-1 1mg
Southern 細 (G-)DNAout 130950-10 10 次
100mL RNase-free 異硫氰酸胍溶液 ,5M
25 T 超微量 ATP 酶測試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)
3g DNA UV 防護劑
25 次 血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒
超微量 ATP 酶測試盒 ( 可測總 ATPase) 18-0180-25 25 T
DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 101215-100 100g
0.1mL×10 SURE 化學(xué)感受態(tài)細胞
50 次 DNA 電泳分子量標準 (3)pUC19/MspI
50 次 柱式凝固血液 DNAout
1mL Stb14 種
Red-Pfu DNA 聚合酶 130837-100 100U
一管式 DNA 膠回收試劑盒 60706-30 30 次
5g 酸性品紅
5次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout
250mL 氨基染膜液