詳細(xì)介紹
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性中國倉鼠的肺組織。1970年由Koyama 等建立。廣泛應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)的染色體畸變檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 25-29;27
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
考馬斯亮藍(lán)G250 分子式: 854.02 分子量: C47H48N3NaO7S2 英文名稱: Kaumas blue G250 CAS號: 6104-58-1
1,2,3,5-四氯苯 分子式: 215.89 分子量: C6H2Cl4 英文名稱: 1,2,3,5- four CAS號: 634-90-2
氨芐青霉素 分子式: 403.45 分子量: C16H25N3O7S 英文名稱: Ampicillin CAS號: 7177-48-2
OP乳化劑 分子式: 324.41192 分子量: C18H28O5 英文名稱: OP emulsifier CAS號: 9002-93-1
硫代米氏酮 分子式: 284.42 分子量: C17H20N2S 英文名稱: TMK CAS號: 1226-46-6
亮綠 分子式: 792.84 分子量: C37H34N2Na2O9S3 英文名稱: Bright green CAS號: 633-03-4
8-氨基萘-1,6-二磺酸 分子式: 303.31 分子量: C10H9NO6S2 英文名稱: 8- two sulfonic acid CAS號: 129-91-9
鉛試劑 分子式: 256.33 分子量: C13H12N4S; C6H5NHNHCSN= 英文名稱: Lead reagent CAS號: 1960/10/6
鄰苯二甲酸 分子式: 166.13 分子量: C8H6O4 英文名稱: Two formic acid CAS號: 88-99-3
1,2-二氯丙烯 分子式: 110.97 分子量: C3H4Cl2 英文名稱: 1,2- two chloride CAS號: 563-54-21mL XL1-Blue 種
1g 肝素
5g 氯化銨 T
10 次 柱式植物 mtDNAout,測序
磷酸肌酸二鹽 CAS19333-65-4 10mg
C41(DE3) 種 12-227 1mL
50 次 血液 RNAout
10mL 紅溶液 ,100mg/mL
1g 5- 磷酸吡哆醛,一水
50 次 SDS-PAGE 樣品制備試劑盒
L- 谷氨酸 CAS6106-04-3 25g
YPDG 液體培養(yǎng)基 130897-100 100mL
500g 胰蛋白胨
1g 膠原蛋白Ⅰ型
100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B
0.1mg 山羊抗兔 IgG,熒光素 488 標(biāo)記
1- 萘胺 CAS134-32-7 5g
小鼠抗 GFP 標(biāo)簽單抗 130580-100 100μL
100g 植物凝膠
25g L- 精氨酸
5g #NAME?
500g 腦心浸液
葡聚糖凝膠 LH-20 CAS9041-37-6 25g
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液 100867-500 500mL