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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-E2價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-E2細胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因,能穩(wěn)定表達E2蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士構(gòu)建于2008年并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
桂皮醛 分子式: 132.16 分子量: C9H8O 英文名稱: Cinnamaldehyde CAS號: 14371-10-9
左旋千金藤啶堿 分子式: 327.37434 分子量: C19H21NO4 英文名稱: L-stepholidine CAS號: 16562-13-3
Hanks’ Balanced Salts 分子式: 分子量: 英文名稱: Hanks equilibrium salt CAS號: N#A2968
酸性藍 分子式: 566.66 分子量: C27H31N2NaO6S2 英文名稱: Acid blue CAS號: 116-95-0
氯化硝基四氮唑藍(NBT) 分子式: 817.6 分子量: C40H30N10O6 · 2 英文名稱: Nitro blue tetrazolium chloride (NBT) CAS號: 298-83-9
溴酚藍 分子式: 669.96 分子量: C19H10Br4O5S 英文名稱: Bromine phenol blue CAS號: 115-39-9
1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL 分子式: 188.27 分子量: C13H16O 英文名稱: 1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL CAS號: 5689-19-0
頭孢拉定 分子式: 349.41 分子量: C16H19N3O4S 英文名稱: Setting of the CAS號: 38821-53-3
硫化劑HVA-2(PDM) 分子式: 268.23 分子量: C14H8N2O4 英文名稱: HVA-2 (PDM) CAS號: 3006-93-7
亞硝基紅鹽 分子式: 377.26 分子量: C10H5NNa2O8S2;ONC1 英文名稱: Nitroso R salt CAS號: 525-05-3
茜素 分子式: 240.21 分子量: C14H8O4 英文名稱: Alizarin CAS號: 72-48-0 一站式植物 mRNAout 81028-25 25 次
10mL 鎳柱介質(zhì)
100μL Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制劑 )
10mg Hydroxystilbamidine
30 次 通用型全基因組擴增試劑盒
JC-1 22-0410-1 1mg
土壤腐殖酸清除劑 70603-100 100mL
120mL 氣相 RNase 清除劑
150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR
100mL 動物 RNAout(TRIzol)
500U Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶
人內(nèi)皮細胞分離液 1.060 120901-200 200mL
柱式病毒 DNAout 70701-50 50 次
200μL ROX 參考染料
250mg 赤
100mL RNase-free ,3M,pH 5.2
200mL 人淋巴細胞分離液 1.077(FICOLL 配置 )
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 ) 18-0330-250 250 T
TAE 電泳液 ,50× 100211-250 250mL
5g 傘形酮
100mL DNA CTAB 溶液,20%
50 次 柱式 OLIGO 回收試劑盒
1mL Rosetta-gami B(DE3)plysS 種
WarmStart Bst DNA 聚合酶 131162-1600 1600U
電泳過硫酸銨 100879-1 0.1gx10