詳細介紹
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-*直銷操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-*直銷現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞為二氫葉酸還原酶缺陷細胞。 在沒有HT(次黃嘌呤-胸腺嘧啶)時細胞會死亡。 細胞培液中加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細胞的生長。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.1mM次黃嘌呤,0.016mM胸腺嘧啶,100nM氨甲喋呤
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
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IMCL-002 HH-16 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞 1×106 1ml/T75 1500 元
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RDCL-006 RH-35 大鼠肝癌細胞 1×106 1ml/T75 450 元
點擊 人腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒胞 人腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒胞 試劑盒 試劑盒 元50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ
100U DNA 促旋酶 (E.coli)
D- 甘露醇 CAS69-65-8 250g
十二烷基磺酸 131049-100 100g
50 次 柱式水樣 DNAout
10mg 莽草酸
100g 矮壯素
100mL RNase-free CTAB 溶液 ,20%
1mL Y187 酵母種
ATP 依賴的 DNase 120510-200 200U
環(huán)狀 DNA 全基因組擴增試劑盒 100947-30 30 次
10mL 微量核酸沉淀劑
1g Hemoglobin(NO 清除劑 )
5g D(+) 木糖
250 mL Zamboni 固定液
維生素 B1 CAS59-43-8 10g
成骨細胞生長因子 21-0010-5 5mL
柱式凍存血液 DNAout 120720-50 50 次