詳細(xì)介紹
黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性黃胸鼠的肺組織。1988年中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。具有2個(gè)B染色體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 42+2B
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒、人二硫化物異構(gòu)酶前體elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[ATF-1elisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[ATF-1試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[apo-B100elisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[apo-B100試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[ANNA-1elisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[ANNA-1試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[ALAelisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[ALA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
96 支 10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )
250g 干粉型 SOC 培養(yǎng)基
Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 ) 23-0210-50 50mg
非酶 RNA 清除劑 1.0 51203-1.5 1.5mL
1mg SB203580(p38MAPK 抑制劑 )
20 次 DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒
100 次 膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒
50 次 糖蛋白蛋白純化試劑盒
赤蘚紅 B 二鹽 CAS16423-68-0 5g
WGA 糖蛋白分離試劑盒 131205-10 10 次
100mL 增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒
10mL 鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL
2mg 1400W(iNOS 抑制劑 )
1mg Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )
100μL Aminoally-dUTP 溶液,10mM
總谷胱甘肽檢測試劑盒 18-0730-100 100 次
SSPE 溶液 ,20× 100809-100 100mL
0.1mL×10 TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
100mL 非凍型組織 DNA 保存液
[ACVelisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[ACV試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[Ⅷ-Agelisa試劑盒]規(guī)格型號(hào):96T/48T關(guān)鍵詞:[Ⅷ-Ag試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
蘋果酶試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T蘋果酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:蘋果酶試劑盒、蘋果酶elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人CD14分子試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人CD14分子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人CD14分子試劑盒、人CD14分子elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
雞白介4試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T雞白介4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:雞白介4試劑盒、雞白介4 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人ICE酶激活試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人ICE酶激活試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人ICE酶激活試劑盒、人ICE酶激活elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。