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抗人SH3-結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞；SH3-domain binding protein圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 抗人SH3-結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞；SH3-domain binding protein圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 產(chǎn)生單克隆抗體為IgG1型；ELISA(+)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
鹿紅細(xì)胞膜試劑盒規(guī)格型號：96T/48T鹿紅細(xì)胞膜試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：鹿紅細(xì)胞膜試劑盒、鹿紅細(xì)胞膜試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
兔子免疫球E試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子免疫球E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子免疫球E試劑盒、兔子免疫球E elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒、兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒規(guī)格型號：96T/48T兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔可溶性凋亡相關(guān)試劑盒、兔可溶性凋亡相關(guān)elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
人組織酶D試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人組織酶D試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織酶D試劑盒、人組織酶D elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A試劑盒、人瘤壞死配體相關(guān)分子-1A elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒、人和adipoQ受體家族成員Ⅶ elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。1mL 桿菌肽溶液 ,100mg/mL
螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒 100 次 130597-100
TE 緩沖液，PH7.5 10mL 80934B-10
5次 Southern 動物 DNAout
100mg DiOC6(3) 碘化物
15 次 非酶 DNA 清除劑 -2
1mL C41(DE3) 菌種
克必隆 eTS mRNA 擴(kuò)增試劑盒 10 次 130402-10
低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次 90211-50
40uL×4 雙脫氧 dNTP 套裝
200mL 大鼠單核細(xì)胞分離液 1.082
50mL 剝離硅烷
10mL 木瓜蛋白酶抑制劑溶液，0.5 mg/mL
DpnI 500U 17-0040
TMB 法地高雜交試劑盒 5次 130999-5
250U Tth DNA 聚合酶
100mL 杜氏 PBS 緩沖液 ,10×
5次 PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒
10,000 milli U 三磷酸苷雙磷酸酶
微生物種屬鑒定及分型 1次 D012-1
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 50 次 91107B-50
48 T 維生素 C 測試盒
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