詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIF1D2C8F11圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIF1D2C8F11圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C34
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
大鼠抑制B試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠抑制B試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠抑制B試劑盒、大鼠抑制Beisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒、人α平滑肌肌動(dòng)elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人E選擇試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人E選擇試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人E選擇試劑盒、人E選擇elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒、人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒、人鼠嗜粒細(xì)胞趨化elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人聚試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人聚試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人聚試劑盒、人聚elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人胃泌釋放多試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人胃泌釋放多試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人胃泌釋放多試劑盒、人胃泌釋放多elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽
10mL Sephacryl S-400 基質(zhì)
脂肪酶 5g CAS9001-62-1
胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液,20mg/mL 1mL 100539-1
50 次 柱式酵母 DNAout
1000U MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)
10mg apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白
250mL 非凍型組織 DNA 保存液
1mL BL21-CodonPlus-RIL 菌種
堿性磷酸酶,大腸桿菌 25U 120405-25
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒 10 次 130308-10
1mL WB600 枯草宿主菌菌種
25g 過硫酸銨
25g 十六烷基*基溴化銨
250 mL 4% 多聚甲醛
胰蛋白酶抑制劑 100m CAS9035-81-8
DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 ) 100mL 19-0040-100
RNA 長效保存液 1.5mL 3100-1.5