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小鼠肺成纖維樣細(xì)胞；C57/B6-L圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 小鼠肺成纖維樣細(xì)胞；C57/B6-L圖片
形態(tài)特性  成纖維樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一正常雄性C57/B6小鼠的肺組織。2013年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 無
染色體 
使用權(quán)限 A類

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

人羰基化試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人羰基化試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人羰基化試劑盒、人羰基化elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人胃泌試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人胃泌試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人胃泌試劑盒、人胃泌elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人皮質(zhì)激受體α試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人皮質(zhì)激受體α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人皮質(zhì)激受體α試劑盒、人皮質(zhì)激受體αelisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體試劑盒、雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞C受體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人水通道4試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人水通道4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人水通道4試劑盒、人水通道4elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
雞白介1β試劑盒規(guī)格型號：96T/48T雞白介1β試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞白介1β試劑盒、雞白介1βelisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人S試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人S試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人S試劑盒、人Selisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒規(guī)格型號：96T/48T人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人低密度脂免疫復(fù)合物試劑盒、人低密度脂免疫復(fù)合物elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。5g        金精三羧酸
100g        氯化膽堿
100 次        細(xì)胞計(jì)數(shù)液 (Vi-CELL 儀 )
果膠酶 Y-23    100mg    CAS9032-75-1
丁基介質(zhì)    50mL    130426-50
5次        中提柱式 BAC DNAout
5μg        lambda(λ)DNA
500U        丁酰膽堿酯酶
20 次        雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD） 
S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石    25mg    CAS98185-20-7
低 pH 緩沖液套裝    30 次    100830-30
1000μL        組蛋白 3.1 小鼠單抗
100g        氯化膽堿
1g        多聚半乳糖醛
250 T        過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )
磷酸二酯酶Ⅰ    100U    CAS9025-82-5
魯米諾血跡鑒定試劑盒    100mL    140646-100
真菌 RNAout    250 次    60305-250