詳細(xì)介紹
抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞;HAb18說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞;HAb18說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 產(chǎn)生單克隆抗體為IgG1型;FCM(+),WB(+),ELISA(+),ICH(+)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒、大鼠淋巴細(xì)胞趨化eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠活化A試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠活化A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠活化A試劑盒、大鼠活化Aeisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒、大鼠抗雙鏈DNA抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒、大鼠凋亡相關(guān)配體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠大內(nèi)皮試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠大內(nèi)皮試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠大內(nèi)皮試劑盒、大鼠大內(nèi)皮eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠層連試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠層連試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠層連試劑盒、大鼠層連eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠c-jun試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠c-jun試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠c-jun試劑盒、大鼠c-juneisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠β細(xì)胞試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠β細(xì)胞試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠β細(xì)胞試劑盒、大鼠β細(xì)胞eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠主要堿性試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠主要堿性試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠主要堿性試劑盒、大鼠主要堿性eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
100g 麥芽浸膏
5g 吖啶橙
50 次 菌落 PCR 試劑盒 2.0
1mL GS115 酵母菌種
9° N DNA 連接酶 2500U 130624-2500
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒 50 次 101219-50
0.1mL 微量 DNA 助沉劑
500mL HAT 篩選培養(yǎng)基
5g 維生素 B6
250 mL PLPD 固定液
脲酶 ( 尿素酶 巨豆 ) 20Ku CAS9002-13-5
McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 ) 500mL 19-0140-500
96 孔板血液 DNAout( 真空法 ) 5次 80920-5
100mL 曲拉通 X-100
100mg Dansyl chloride
10 次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout
60U Poly(U) 聚合酶
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷 (BCIP) 100mg CAS102185-49-9
WB600 枯草宿主菌菌種 1mL 12-210
50 次 一管式病毒 DNAout
250mL 考馬斯亮藍(lán) G-250 染液