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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株；1C4F6價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
雜交瘤細(xì)胞株；1C4F6價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1次 一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 )
10×100μL JM110 感受態(tài)細(xì)胞
1g 魚精蛋白硫
200mL 乙烯乙二醇
L- 羥基脯氨酸 5g CAS51-35-4
硫酸鏈溶液 ,50mg/mL 10mL 60210-10
100mL 印跡膜抗體稀釋液
250g 聚乙二醇 8000
1g 次黃嘌呤
1000U MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)
青 G 鹽 1g CAS69-57-8
牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL 1mL 131070-1
1mg 重組蛋白 G
1mL LBA4404 農(nóng)桿菌菌種
1000U 葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶
50 次 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）
3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 10g CAS29915-38-6
考馬斯亮藍(lán) G-250 染液 250mL 80812-250
5g α- 酮戊二酸
1g 氯化血紅素
2mg 抑肽酶
48 T 堿性磷酸酶測試劑盒
酪氨酸脫羧酶 25U CAS9002-09-9NIS 鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Junctophilin 3 連接蛋白JPH3抗體規(guī)格: 0.2ml
GRAP2 生因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 類固醇受體激活蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
COX6B 細(xì)胞色素C氧化酶亞基6B抗體規(guī)格: 0.2ml
Nicastrin 老年性癡呆蛋白APH2抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體規(guī)格: 0.1ml
C11orf21 11號(hào)染色體開放閱讀框21抗體規(guī)格: 0.2ml
Metallothionein 3 金屬硫蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
GDN/SERPINE2 膠質(zhì)源性連接蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
ADAM9 去整合素樣金屬蛋白酶9抗體 0.2ml
MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
Brd4/CAP 染色體相關(guān)蛋白CAP抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-SYN1(Ser549) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
LFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
DENND2D MAP激酶激活死亡域蛋白2D抗體規(guī)格: 0.2ml
plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 0.2ml
KLK15 激肽釋放酶15抗體規(guī)格: 0.2ml
PITX2 成對(duì)樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體規(guī)格: 0.2ml
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