詳細介紹
雜交瘤細胞株;CD98-2D3價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
雜交瘤細胞株;CD98-2D3價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115) 磷酸化Bcl-xL蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
LOXL2 賴氨酰氧化酶相關蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-ATG16A(Ser287) 磷酸化自噬相關蛋白16A抗體規(guī)格: 0.1ml
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
P14ARF 抑基因p14抗體規(guī)格: 0.1ml
SUFU/Suppressor of Fused 抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體規(guī)格: 0.2ml
IL-6 白介素6抗體規(guī)格: 0.1ml
PMVK 磷酸甲羥戊酸激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
PCDHA10/CNRN8 鈣粘蛋白相關神經(jīng)受體8抗體規(guī)格: 0.2ml
RORG/ROR gamma 維甲酸相關孤兒受體γ抗體規(guī)格: 0.2ml
NF2/Neurofibromin 2 2型神經(jīng)纖維瘤抗體規(guī)格: 0.1ml
Bestrophin 3 卵黃狀黃斑病蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
SNF5 轉錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體規(guī)格: 0.2ml
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體規(guī)格: 0.2ml
DGCR6L 無胸腺癥關鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)規(guī)格: 0.2ml
DAB2 信號轉導功能磷蛋白DAB2抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Myt1(Ser83) 磷酸化髓鞘轉錄因子1抗體規(guī)格: 0.1ml
Thymulin 胸腺素抗體規(guī)格: 0.2ml250mg 新生
250U 核酸內(nèi)切酶 V
5g 二硫蘇糖醇 (DTT)
25mL 十二烷基磺酸清除劑
遺傳 100mg CAS108321-42-2
干粉型 LB 培養(yǎng)基 250g 100602-250
30 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)
5mL 間充質(zhì)干細胞脂防細胞分化生長因子
100mL β- 乙醇
1g 魯米諾
次(亞)甲基蘭 10g CAS7220-79-3
L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 5g 120705-5
1g 支鏈淀粉
1g 苦杏仁苷
250g 磷酸二氫
10×100μL EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞
D- 核糖 5g CAS50-69-1
β- 乙醇,蛋白 10mL 131052-10
50 次 柱式土壤 RNAout
10U 磷酸二酯酶Ⅱ
1套 CN/DAB 底物套裝