詳細(xì)介紹
放射抗拒性Lewis肺癌細(xì)胞株;R-LLC價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
放射抗拒性Lewis肺癌細(xì)胞株;R-LLC價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
IL-6 白介素6規(guī)格: 0.1ml
TSPAN10/Oculospanin 四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白)規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG規(guī)格: 0.1ml
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體規(guī)格: 0.1ml
RanBP2 RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Hrasls3/HREV107 HRAS樣抑制因子3抗體規(guī)格: 0.2ml
Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制劑D抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
HDAC2/HD2 組蛋白去乙酰化酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
FBXO21 F-box蛋白21抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
HBeAg(2E9) 人乙型肝炎e抗原單克隆抗體(1)規(guī)格: 0.1ml
IQCK IQCK蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgM規(guī)格: 0.1ml
GPX1 谷胱甘肽過氧化酶1規(guī)格: 0.2ml
GRAMD2 GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG規(guī)格: 0.1mlWTRL1(大鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞gersion
NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hs68(人男性正常龜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名稱:EMT-6
Ampicillin(100mg/ml,1000X)規(guī)格:5*1ml
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:500次
3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人腎透明細(xì)胞膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱:Caki
Nitsch培養(yǎng)基/Nitsch MediumBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:CW-2
對氨基苯甲酸培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌)/PABA培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌)/PABA Medium(Bacteria)磺胺類藥品的無菌試驗用250克國產(chǎn)/進(jìn)口
結(jié)腸阿霉素耐藥株英文名稱:LOVO/Adr
氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)/Sodium Chloride Blood Agar Base副溶血性弧菌的溶血試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
山梨醇麥康凱瓊脂平板/Sorbitol Maconkey Agar Plate10塊國產(chǎn)/進(jìn)口
RKO(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2