小鼠正常皮膚角質細胞；MNSK/HL-006圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 小鼠正常皮膚角質細胞；MNSK/HL-006圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Netrin 4  軸突生誘向因子4抗體規(guī)格: 0.1ml
PI3 Kinase p110 delta  磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體規(guī)格: 0.1ml
RPH3AL  Ras相關GTP結合蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
PAPPA  娠相關血漿蛋白A抗體規(guī)格: 0.1ml
phosphos-PCNA (Tyr211)  磷酸化增殖細胞核抗原抗體規(guī)格: 0.1ml
Bax  Bax抗體規(guī)格: 0.1ml
CRISP3  富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-RPS6KB1(Thr 412)   磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-ATG1(Ser556)  磷酸化自噬相關蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
Ferritin Light Chain  鐵蛋白輕鏈抗體規(guī)格: 0.1ml
ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體規(guī)格: 1ml
MRF/C11orf9  髓鞘基因調控因子抗體規(guī)格: 0.2ml
SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2  肝細胞生因子激活抑制蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
NCF/NCF4/p40phox  嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體規(guī)格: 0.1ml
CRIPT  突觸后蛋白CRIPT抗體規(guī)格: 0.2ml
RBM5/LUCA15  瘤抑制基因LUCA15抗體規(guī)格: 0.2ml
MLH1/hMLH 1  錯配修復蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
MMAA/cblA  甲基丙二酸尿癥cblA抗體規(guī)格: 0.2ml高鹽察氏瓊脂/高鹽察氏培養(yǎng)基/Salt Czapek Dox Agar用于霉菌和酵母菌的計數250克國產/進口
非洲綠猴SV40轉化的腎細胞英文名稱：COS-1
木糖發(fā)酵管BR20支國產/進口
大鼠肝細胞英文名稱：BRL
五號膽鹽/5號膽鹽/膽鹽5號/膽酸-脫氧膽酸鈉鹽混合物/Bile salt No. 5BR，70%25克國產/進口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml、18ml國產
RAG(小鼠腎腺細胞)5×106cells/瓶×2
PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)gersion
PATU8988(人胰腺細胞)5×106cells/瓶×2
MG-63, 人骨肉瘤細胞gersion
MSTO-211H(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
HMy2.CIR(人B淋巴母細胞)5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2
DH82(犬巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠下結締組織細胞英文名稱：A9
ACHN, 人腎細胞腺細胞
豚鼠肺成纖維樣細胞英文名稱：GPL1
3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產/進口
人腎成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
NZYM肉湯/NZYM BrothBR100克國產/進口
人膠質母細胞瘤細胞英文名稱：A172