詳細介紹
雜交瘤細胞株;CH3價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
雜交瘤細胞株;CH3價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Aminoally-dUTP 溶液,10mM 100μL
18-0730-100 總谷胱甘肽檢測試劑盒 100 次
100809-100 SSPE 溶液 ,20× 100mL
TG1 化學感受態(tài)細胞 0.1mL×10
非凍型組織 DNA 保存液 100mL
胃蛋白酶抑制劑 5mg
植物種屬鑒定 PCR Mix 2 100 次
CAS9003-39-8 聚乙烯吡咯烷酮 40000 100g
81211-250 Western 印跡膜洗膜液 250mL
130699-3000 RNase 抑制劑 ( 小鼠源 ) 3000U
牛血清白蛋白 5g
Calcein Blue 250mg
非凍型血液 DNA 保存液 100mL
茜素紅 S 染色試劑盒 100mL
18-0620-100 一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 ) 100 T
100808-1 溴化乙錠干粉 (EB) 1g
神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒 100 次
DNA 快速連接試劑盒 100 次
BCA 法蛋白定量試劑盒 500 次
克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫構建試劑盒 1套
130645-80 8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶 80U大鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
H4(人腦神經(jīng)膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基/Mould And Yeast Chromogenic Medium用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)1升國產(chǎn)/進口
大鼠海馬神經(jīng)元細胞*培養(yǎng)基100mL
維生素B12測定用培養(yǎng)基/Vitamin B12 Assay Broth嬰兒食品和粉中維生素B12測定250克國產(chǎn)/進口
SW626(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2
Primary Antibody Diluent/一抗稀釋液(綠色)20ml國產(chǎn)gersion
293FT(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
MN-c, 小鼠質神經(jīng)元gersion
OP9(小鼠骨髓基質細胞)5×106cells/瓶×2
HT-29(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2
BT-549(人腺管細胞)5×106cells/瓶×2
EBV-轉化人淋巴細胞英文名稱:MAO
小鼠腺細胞英文名稱:4T1
Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:100次
小鼠Ⅱ型肺泡上細胞*培養(yǎng)基100mL
3% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
人腎小球內細胞*培養(yǎng)基100mL
M-肉湯/M肉湯/M-Broth牛奶和制品中酸菌檢測和增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口