詳細介紹
分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株;4H11圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株;4H11圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Tricine 干粉,電泳 100g
DNA 修復混合液 150 次
131089-1 R- 藻紅蛋白標記親和素 1mg
90708-9 即用型高保真 PCR 試劑盒 9mL
脫氧膽酸 10g
放線酮 100mg
四甲基乙二胺 25mL
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q) 2000U
CAS9087-70-1 抑肽酶 2mg
120514-20 即用型藍白 T 載體 D 型 ( 無啟動子,有 MCS) 20 次
苷脫氨酶 250U
固藍 BB 鹽 5g
固綠 5g
接頭 DNA(Sal I-Sma I) 5nmol
CAS9004-54-0 葡聚糖 T-2000 10g
12-131 Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種 1mL
液相內毒素清除劑 500 次
JM109(DE3) 菌種 1mL
L- 阿拉伯糖 10g
DNA 包被溶液 100mL
CAS636-00-0 6- 羥基多巴胺 5g
120701-10 鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL 10mL
吲哚 -3- 1g
聚乙二醇 6000 250g KB(人口腔表樣細胞)5×106cells/瓶×2
HeLa/宮頸細胞株國產
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
5637, 人膀胱細胞
人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
改良番茄汁培養(yǎng)基/改良番茄汁瓊脂/Tomato Juice Agar Modified食品中酸菌總數測定250克國產/進口
NCI-H2170(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
細胞名稱
人胰腺上細胞*培養(yǎng)基100mL
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測食品中沙門氏菌250克國產/進口
人臍動脈內細胞
VRBG瓊脂/結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂/VRBGA/Violet Red Bile Glucose Agar/VRBG Agar奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)250克國產/進口
人肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
假單胞F瓊脂/Pseudomonas Agar F銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗250克國產/進口
大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄球菌選擇性瓊脂/貝爾德-帕克瓊脂/Staphylococcus Selective Agar/Baird Parker Agar凝固酶陽生葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產/進口