詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HE4-2B8圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HE4-2B8圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
90315-100 非凍型尿液 DNA 保存液 100mL
葡萄糖 -6- 磷酸二 500mg
鼻腔采樣拭子 50 支
基因列表 --
DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 100U
120893-200 大鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.068 200mL
71205-50 柱式土壤 DNAout 50 次
Rosetta(DE3)plysS 菌種 1mL
潮 B 干粉 250mg
液相內(nèi)毒素清除劑 500 次
大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091 200mL
18-0250-24 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測(cè)試盒 24 T
130503-96 無(wú)內(nèi)毒素槍頭,1 mL 1盒
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷 100g
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp) 50 次
柱式細(xì)菌 RNAout 50 次
XL-10 gold 菌種 1mL HC瓊脂基礎(chǔ)/HC Agar Base化妝品中霉菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人胚肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱(chēng):KMB
YT瓊脂/YT AgarBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):U87MG
酵母浸出粉胨葡萄糖肉湯/YPD肉湯/YEPD肉湯/Yeast Extract Peptone Dextrose BrothBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):Rat Astrocytes
七號(hào)膽鹽/7號(hào)膽鹽/膽鹽7號(hào)/膽酸-脫氧膽酸鈉鹽混合物/Bile salt No.7BR25克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
蟾毒靈規(guī)格:20mg/支;98%
亞硫酸鉍指示劑/BSI/Bismuth Sulfite Indicator專(zhuān)做亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基指示劑用60克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SK-CO-1(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MA-891(小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
JAR(人胎盤(pán)絨毛膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株英文名稱(chēng):CHO-K1
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:500次
小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):Pcc4
30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國(guó)產(chǎn)