詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;W5價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;W5價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
β- 瓊脂糖酶Ⅰ 500U
18-0670-48 游離脂肪酸測(cè)試盒 48 T
80915B-100 超雜交液 B(含甲酰胺) 100mL
TE 緩沖液,PH7.0 10mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液 100mL
硼氫化氰 5g
HRP 標(biāo)記的抗地高抗體 10μL
CAS92-71-7 2,5- 二苯基惡唑 5g
12-219 Tuner(DE3)plysS 菌種 1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 30 次
即用型 PCR 檢測(cè)試劑盒系列 50T
氯 5g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 3 100 次
CAS146-68-9 碘硝基四唑紫嘌呤 250mg
90613-100 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 100 次
魚精蛋白硫 1g
Karnovsky 固定液 250 mL
L- 鹽酸半胱氨酸 25g
Carnoy 固定液 250 mL
CAS329-98-6 苯甲基磺 1g
131077-10 組氨酸標(biāo)簽蛋白染色試劑盒 10 次WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HIC(人小腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HCC94(人子宮鱗細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2
人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
制霉菌素檢定培養(yǎng)基/Nystatin Medium250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GBC-SD(人膽囊細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
H22/小鼠肝細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
小鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BSA標(biāo)準(zhǔn)梯度濃度試劑盒(即用型)-鼠IgG1ml x 7國(guó)產(chǎn)
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格:50次
人小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H209
ITC肉湯/TTC肉湯/氯苯酚替卡西林氯酸鹽肉湯/三氯生替卡西林氯酸鹽肉湯/三氯苯氧氯酚替卡西林氯酸鹽肉湯/ITC Broth分離培養(yǎng)耶爾森氏菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人膀胱阿霉素耐藥株英文名稱:BIU-87/Adr
苯丙酸脫羧酶培養(yǎng)基/苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基/Phenylalanine Deaminase Medium用于細(xì)菌苯丙氨酸脫羧酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人大細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H460
精氨酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠小腸引窩上細(xì)胞英文名稱:IEC-6