交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Mineral medium with atrazin
Nutrient agar (oxoid cm3)
Pseudothermotoga medium
Sarcina medium
Sulfolobus medium
Thermoproteus uzoniensis medium
TS agar
自誘導(dǎo)液體培養(yǎng)基（arab啟動子）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）微生物菌種
大腸桿菌Y1090菌種
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞株
Dami細(xì)胞株
HP615細(xì)胞株
MDBK細(xì)胞株
P815細(xì)胞株
SP2/0 [SP20]細(xì)胞株
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒
百萬堿基動物DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式分枝桿菌DNAout
非凍型組織DNA保存液（100 mL）
細(xì)菌DNA提取
生物磁珠2：無包被磁珠
溶壁酶（破壁酶）干粉
液相內(nèi)毒素清除劑（500次）
Southern Marker Oligo（DIG）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）Rabbit Anti-horse IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgG規(guī)格: 0.1ml
FHL2  相互作用蛋白FHL2抗體規(guī)格: 0.1ml
PDZD7  PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
CXCL5  上皮中性粒細(xì)胞活化肽78抗體規(guī)格: 0.1ml
UGCG/Ceramide glucosyltransferase  葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Bio  生物素標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG規(guī)格: 0.1ml
Cobra poison Protein  眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
RGAG4  RGAG4蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Galectin 3  半糖凝集素3抗體規(guī)格: 0.1ml
GCLC/GCLM  γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體（γ-GCSc）規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
SET  SET結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
交瘤細(xì)胞；5G9A10E3圖片FAM82A1  微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-FAK(Tyr407)  磷酸化粘著斑激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-ODF2(Ser796)  磷酸化子尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml