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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞；AMVP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 雜交瘤細(xì)胞；AMVP圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
小鼠上皮中粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA Kit
鴨白介素6(IL-6)ELISA Kit
豬單核細(xì)胞增多李斯特菌素O((LLO)ELISA Kit
豬孕酮（P4）ELISA試劑盒
DNAGuSCN
α-糜蛋白酶
菌素D
藍(lán)色葡聚糖 2000
葡聚糖
胃蛋白酶1：3000
植物血球凝集素P
Butyl alcohol(1-丁醇、正丁醇）
乙酸溶液，0.5%（v/v)
鉻-醋酸固定液，中濃度
Weigert法蘇木精染色試劑盒
Luxol堅(jiān)牢藍(lán)油紅O染色法神經(jīng)組織染色試劑盒
Ackerman 血涂片的隱脂類(lèi)的蘇丹B法類(lèi)脂染色試劑盒
Lillie亞鐵反應(yīng)法色素染色試劑盒
Kuper-May熒光抗酸法抗酸桿菌染色試劑盒Rabbit Anti-dog IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
GRO gamma/CXCL3 生調(diào)節(jié)致基因gamma（GRＯγ）抗體規(guī)格: 0.1ml
IL-9 白介素9抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG規(guī)格: 0.1ml
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體規(guī)格: 0.1ml
ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4 血管生成素3/血管生成素4抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Galanin 神經(jīng)節(jié)肽抗體規(guī)格: 0.2ml
ANGL2/ANGPTL2 血管生成素樣蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
FLIP/c FLIP 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體規(guī)格: 0.1ml
ANKRD54 錨蛋白重復(fù)域54抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-FAK(Tyr576/577) 磷酸化粘著斑激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
FAM150A FAM150A蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Thr386) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
CCDC54/NYD-SP17 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG 羊抗小鼠IgG規(guī)格: 1mg
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