詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞;3B1A15*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
雜交瘤細(xì)胞;3B1A15*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(SGPP1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sphingosine-1-Phosphate Phosphatase 1 (SGPP1)
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Signal Transducer And Activator Of Transcription 3 (STAT3)
大素受體1(CNR1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cannabinoid Receptor 1, Brain (CNR1)
胱天蛋白酶3(CASP3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Caspase 3 (CASP3)
間隙連接蛋白40(CX40)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Connexin 40 (CX40)
白介素1α(IL1α)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interleukin 1 Alpha (IL1a)
V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒基因同源物(FOS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS)
Ⅸ型膠原α3(COL9α3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Collagen Type IX Alpha 3 (COL9a3)
胚抗原(CEA)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Carcinoembryonic Antigen (CEA)
二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Dipeptidyl Peptidase IV (DPP4)
內(nèi)皮素1(EDN1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Endothelin 1 (EDN1)
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2)
再胰島衍蛋白1α(REG1α)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha (REG1a)10 次 Southern 植物 DNAout
100mL DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )
50 次 柱式真菌 DNAout
1mL ER2566 菌種
克必隆 eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒 130410-7 7次
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 ) 80919-1 1次
25g 水楊酸
200mL 大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091
50 次 TRIzol 伴侶
5mL 二氯異香豆素溶液,10mg/mL
KpnI 17-0100 1000U
AP 標(biāo)記的抗地高抗體 131001-10 10μL
1mL Tuner(DE3) 菌種
1g 對(duì)硝基苯磷酸二鹽
5次 TdT 加尾法 DNA 地高標(biāo)記試劑盒
100μg T4 噬菌體基因 32 蛋白
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)服務(wù) D028-1 一個(gè)蛋白
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物 130696-25 25 OD
5g 胃蛋白酶 1:3000
100mL GAL 指示劑培養(yǎng)基
50g D- 泛酸鈣
50g 脫脂奶粉 ( 雜交 )
羧甲基纖維素鹽 CAS9004-32-4 25g
M15 感受態(tài)細(xì)胞 140429-10 0.1 mL×10
100μL 小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗
20μL HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-actin)