詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞;1D14A2A10價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
雜交瘤細(xì)胞;1D14A2A10價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)單克隆抗體Monoclonal Antibody to S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8)
淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原3(LFA3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Lymphocyte Function Associated Antigen 3 (LFA3)
Jagged 1蛋白(JAG1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Jagged 1 Protein (JAG1)
鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SNAT1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sodium Coupled Neutral Amino Acid Transporter 1 (SNAT1)
CD226分子(CD226)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cluster Of Differentiation 226 (CD226)
硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Thiopurine Methyltransferase (TPMT)
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)
凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1)
胰島素樣因子1(IGF1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1)
角蛋白18(KRT18)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Keratin 18 (KRT18)
血小板衍因子受體α(PDGFRα)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Plaet Derived Growth Factor Receptor Alpha (PDGFRa)
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Neurotrophin 4 (NT4)
60kD熱休克蛋白(HSPD1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1)
促性腺激素釋放激素(GnRH)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH)
神經(jīng)介素B(NMB)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Neuromedin B (NMB)50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/MspI
20 次 高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒
纖維蛋白原 CAS9001-32-5 100mg
親和層析柱 140649-1 1 mL
250g 蔗糖
2mg 亮抑酶肽
10g 2-(N- 啡啉 ) 乙磺酸
50mg Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )
20 次 Southern DNA Marker( 生物素 )
蘇木素染色液 130822-15 15mL
鯡魚精 DNA 溶液 130908-1 1mL
5次 TMB 法地高雜交試劑盒
50 次 非酶多糖清除劑 (DNA )
5g 天狼猩紅
100 次 植物種屬鑒定 PCR Mix 10
鐵氰化 CAS13746-66-2 500g
一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 ) 91101B-100 100mL
非酶多糖清除劑 (RNA ) 60204-10 10mL
100mL Oligo(dT) 再生溶液
50 次 Caspase 2 檢測(cè)試劑盒