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          雜交瘤細(xì)胞;1F2圖片

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-23 14:02:19瀏覽次數(shù):280

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          雜交瘤細(xì)胞;1F2圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          雜交瘤細(xì)胞;1F2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
          細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞;1F2圖片
          形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
          生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
          特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。 
          培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
          傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
          傳代情況 C2
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測(cè) 陰性
          STR 
          同工酶 
          染色體 
          使用權(quán)限 未定
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          組織蛋白酶K(CTSK)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cathepsin K (CTSK)
          雌激素受體β(ERβ)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Estrogen Receptor Beta (ERb)
          腦鈉素(BNP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Brain Natriuretic Peptide (BNP)
          髓過(guò)氧化物酶(MPO)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Myeloperoxidase (MPO)
          鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β3肽(ATP1β3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3)
          90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)
          視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)
          整合素α2B(ITGα2B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Integrin Alpha 2B (ITGa2B)
          蛋白酪氨酸磷酸酶受體S(PTPRS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type S (PTPRS)
          山梨醇脫氫酶(SDH)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sorbitol Dehydrogenase (SDH)
          B-細(xì)胞激活因子(BAFF)單克隆抗體Monoclonal Antibody to B-Cell Activating Factor (BAFF)
          蛋白激酶Cα(PKCα)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protein Kinase C Alpha (PKCa)
          干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC)
          鈣蛋白酶2(CAPN2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Calpain 2, Large Subunit (CAPN2)
          去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NET)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Norepinephrine Transporter (NET)
          鞘氨醇1磷酸酯受體1(S1PR1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1)
          尿皮質(zhì)素3(UCN3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Urocortin 3 (UCN3)
          細(xì)胞色素P450家族成員2D6(CYP2D6)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cytochrome P450 2D6 (CYP2D6)
          芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL)200 次    柱式血液 DNAout    
          10mL    制霉菌素溶液 ,2mg/mL    
          ATP 酶測(cè)試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 )    18-0020-50    50 T
          DNA  PVP K30 溶液,20%    100865-100    100mL
          5000U    SP6 RNA 聚合酶    
          100 次    DNA PAGE 膠回收試劑盒    
          1.5mL    酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )    
          1mL    JM103 菌種    
          p19miRNA 檢測(cè)試劑盒     130703-50    50 次
          0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)    120668C-1    1個(gè)
          250mg    四氮唑藍(lán) (NBT)    
          5次    大提柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout    
          25 次    一站式真菌 mRNAout    
          10mL    膦酰二肽溶液,10mg/mL    
          NotI    17-0160    150U
          顯影粉    130808-1    1袋
          100 次     胎盤堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒    
          25mg    多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬(wàn) )    
          1只    硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管    
          10000U    核糖核酸酶 RNase If    
          RACE 技術(shù)服務(wù)    R004-1    1次
          ATP 溶液,2.5mM    131216-2    2mL

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