詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;DV2-M14價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細胞;DV2-M14價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
0.1mL×10 Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞
48 T 超氧化物歧化酶測試盒
100mL RNase-free PVP K30 溶液 ,20%
200mL 大鼠 NK 細胞分離液 1.068
膽堿酯酶測試盒 18-0220-48 48 T
DNA HEPES( 羥乙基乙硫磺酸 ) 131018-100 100g
1mL 噻孢溶液 ,100mg/mL
50 次 DNA 電泳分子量標準 (3)λDNA/HindIII
50mL RNA 洗脫液
1mL Tuner(DE3) 菌種
Tfl DNA 聚合酶 131037-100 100U
DNA PAGE 膠回收試劑盒 70908-100 100 次
5mL 髓核細胞生長因子
1mL 單細胞裂解液 (DNA)
250mL Western 印跡膜洗膜液
1000μL 植物 Actin 小鼠單抗
核酸外切酶 I 120410-750 750U
石蠟油,PCR 130841-10 10mL
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒
10mL EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白
50 次 膜結(jié)合 DNA 清除試劑盒
1袋 定影粉
乙腈 CAS75-05-8 25mL
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix 131128G-100 100 次
0.5g X-Gal 干粉
原卟啉原氧化酶(PPOX)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)
鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B)
V-Yes-1 Yamaguchi肉瘤病毒相關(guān)基因同源物(LYN)單克隆抗體Monoclonal Antibody to V-Yes-1 Yamaguchi Sarcoma Viral Related Oncogene Homolog (LYN)
UDP葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶1家族多肽A1(UGT1A1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to UDP Glucuronosyltransferase 1 Family, Polypeptide A1 (UGT1A1)
腎瘤抗原(RAGE)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Renal Tumor Antigen (RAGE)
母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶(MELK)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Maternal Embryonic Leucine Zipper Kinase (MELK)
甲型肝炎病毒細胞受體2(HAVCR2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Hepatitis A Virus Cellular Receptor 2 (HAVCR2)
二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Di-N-Acetyl Chitobiase (CTBS)
α-甲基?;o酶A消旋酶(αMACR)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Alpha-Methylacyl Coenzyme A Racemase (aMACR)
正五聚蛋白3(PTX3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Pentraxin 3, Long (PTX3)
EGF樣域蛋白7(EGFL7)單克隆抗體Monoclonal Antibody to EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
Ras相關(guān)C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)