鼠/人雜交瘤細胞系；Hybrid Liver cell GLH04圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 鼠/人雜交瘤細胞系；Hybrid Liver cell GLH04圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

IRF3  干擾素調(diào)節(jié)因子3    規(guī)格:0.1ml
Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)  磷酸化D型阿片受體抗體    規(guī)格:0.1ml
LIF  白病抑制因子抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-DAXX (Ser671)  磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體    規(guī)格:0.1ml
MCSF/M-CSF  巨噬細胞克隆刺激因子抗體    規(guī)格:0.1ml
MMP-15  基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體    規(guī)格:0.1ml
CHRNA2(neuronal)  煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-NFKB p65(Ser529)  磷酸化細胞核因子抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-NMDAR2B (Tyr1336)  磷酸化谷氨酸受體2B抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr187)  磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體    規(guī)格:0.1ml
PAK4  p21激活激酶4抗體    規(guī)格:0.1ml
PDPK1  3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體    規(guī)格:0.2ml
PLC beta 3  磷酯酶Cβ3抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-PKR (Thr451)  磷酸化蛋白激酶R抗體    規(guī)格:0.1ml
Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體    規(guī)格:0.2ml
phospho-ROCK2(Thr396)  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體    規(guī)格:0.1ml
SHC  SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體    規(guī)格:0.2ml
Phospho-MYPT1 (Thr853)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體    規(guī)格:0.1ml
Streptococcus suis 2  2型豬鏈球菌菌體蛋白抗體    規(guī)格:0.2ml
phospho-ANTXR1(Tyr382)  磷酸化瘤管內(nèi)皮標志物8抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)  磷酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1418)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體    規(guī)格:0.1mlWestern 印跡膜洗膜液    81211-250    250mL
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    130699-3000    3000U
5g    牛血清白蛋白    
250mg    Calcein Blue     
100mL    非凍型血液 DNA 保存液    
100mL    茜素紅 S 染色試劑盒    
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學(xué)法 )    18-0620-100    100 T
溴化乙錠干粉 (EB)    100808-1    1g
100 次    神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒    
100 次    DNA 快速連接試劑盒    
500 次    BCA 法蛋白定量試劑盒    
1套    克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒    
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶    130645-80    80U
地高標記 dUTP 溶液    100921-25    25μL
250U    Taq 酶抗體    
10mg    碘化丙啶苯    
100mL    胰酶消化液 ( 含 EDTA)    
100 次    雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒    
鏈霉親和素，AP 標記    131022-0.5    0.5mL
即用型易錯 PCR 試劑盒    101005-100    100 次
300μL    兔抗雞 IgY，辣根過氧化物酶標記    
50U    Furin 蛋白酶    
100mg    遺傳    
10 塊    LB 平板培養(yǎng)基 (Tet 抗性 )