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詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞；HB KC-48圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱小鼠雜交瘤細(xì)胞；HB KC-48圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體 規(guī)格:0.2ml
CKLFH4/CMTM4 趨化素樣因子超家族成員4抗體 規(guī)格:0.2ml
Signal recognition particle 信號(hào)識(shí)別顆?？贵w 規(guī)格:0.1ml
CSTP1 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶CSTP1抗體 規(guī)格:0.2ml
GIMAP8 GTP酶IMAP家族成員8抗體 規(guī)格:0.2ml
NIPA 間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格:0.1ml
Nitrotyrosine 硝基酪氨酸抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體 規(guī)格:0.1ml
FBXO28 FBXO28蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
VGLL1 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 規(guī)格:0.2ml
PJA2/RNF131 環(huán)指蛋白131抗體 規(guī)格:0.2ml
KF1/ZFP103 鋅指蛋白103抗體 規(guī)格:0.2ml
NFAT5 活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
VMAT2 腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml4- 甲基傘形酮 CAS90-33-5 10g
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗 130573-1000 1000μL
5g 脂肪酶
10g L- 阿拉伯糖
100g 丙烯酰胺
10×100μL NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞
番紅 O CAS477-73-6 5g
鹽酸胍溶液，8M 131120-200 200mL
50 次 柱式細(xì)菌 RNA-DNA 雙提試劑盒
500g 磷酸氫二
10mg 牛甲狀素蛋白
1000U PvuII
玉米素 CAS13114-27-7 5mg
植物 Actin 小鼠單抗 130570-30 30μL
非凍型組織 RNA 保存液 3060-100 100mL
25g 咪唑
0.5mL dGTP 溶液，100mM
4次 大提柱式細(xì)菌 DNAout( 含溶菌酶 )
200U 尿嘧啶糖基化酶抑制劑
丁酸 CAS156-54-7 1g
DNA 快速連接試劑盒 70602-30 30 次
20 次 一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
10 次 克必隆 eTS 核心試劑盒
100g 可溶性淀粉
RIMKLA/FAM80A 核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 規(guī)格:0.2ml
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
C3orf33 3號(hào)染色體開放閱讀框33抗體 規(guī)格:0.2ml
PAPP A2 娠相關(guān)漿蛋白A2抗體 規(guī)格:0.2ml
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