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          GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞;U14-GFP圖片

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-23 14:08:21瀏覽次數(shù):444

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞;U14-GFP圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞;U14-GFP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
          細(xì)胞名稱     GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞;U14-GFP圖片       
          形態(tài)特性      上皮細(xì)胞樣        
          生長特性     貼壁生長        
          特征特性      該細(xì)胞攜帶綠色滎光蛋白基因,可表達(dá)綠色滎光蛋白,可作為報(bào)告基因用于外源基因表達(dá)研究。         
          培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
          傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代        
          傳代情況     C7        
          凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
          支原體檢測     陰性         
          STR      STR鑒定        
          同工酶             
          染色體             
          使用權(quán)限     A類
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

           N-(4-chloropentyl) analog (100 ug)(1-(4-chloropentyl)-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)methanone;  N-(4-chloropentyl) analog
          Alexidine (hydrochloride) (50 mg)N1,N14-bis(2-ethylhexyl)-3,12-diimino-2,4,11,13-tetraazatetradecanediimidamide, dihydrochloride; Alexidine (hydrochloride)
          3,4-MDMA (hydrochloride) (5 mg)N,α-dimethyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride; 3,4-Methylenedioxymethylamphetamine|NSC 168383; 3,4-MDMA (hydrochloride)
          MT-45 (hydrochloride) (50 mg)1-cyclohexyl-4-(1,2-diphenylethyl)-piperazine, dihydrochloride; NSC 299236; MT-45 (hydrochloride)
          (±)-β-Hydroxybutyrate-d4 (sodium salt) (1 mg)3-hydroxy-butyric-3,4,4,4-d4-acid, monosodium salt; β-Hydroxybutanoic Acid-d4; (±)-β-Hydroxybutyrate-d4 (sodium salt)
          AKB48 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (1 mg)N-((3s,5s,7s)-adamantan-1-yl)-1-(4-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide; APINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite; AKB48 N-(4-hydroxypentyl) metabolite
          MDL 28170 (50 mg)N-[(1S)-1-[[(1-formyl-2-phenylethyl)amino]carbonyl]-2-methylpropyl]-carbamic acid, phenylmethyl ester; Calpain Inhibitor III; MDL 28170
          S3I-201 (10 mg)2-hydroxy-4-[[2-[[(4-methylphenyl)sulfonyl]oxy]acetyl]amino]-benzoic acid; NSC 74859; S3I-201甘油    CAS56-81-5    100mL
          放線菌素 D 溶液 ,1mg/mL    120680-1    1mL
          100mL    胰酶消化液 ( 無 EDTA)    
          5mL    角質(zhì)細(xì)胞生長因子    
          100g    麥芽糖    
          30 次    免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒    
          茚三酮    CAS485-47-2    10g
          小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗    130584-100    100μL
          50 次    植物葉綠體蛋白提取試劑盒    
          10g    L- 鳥氨    
          500mg    崩潰酶    
          250mL    超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測試劑盒 2.0     
          莽草酸    CAS138-59-0    10mg
          一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)    100908B-30    30 次
          100 次    柱式質(zhì)粒 DNAout    
          5mg    硫氧還蛋白    
          250U    苷脫氨酶    
          50 T    GSH 試劑盒 ( 谷胱甘肽測試盒 )( 比色法 )    
          梭菌蛋白酶    CAS9028-00-6    10μg
          山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記    131149-1000    1000μL
          液體樣品 RNAout    80929-50    50 次
          1g    N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯    
          10mL    4× 核酸液相雜交液    

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