詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HRP價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HRP價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
11(R)-HETE (50 ug)11R-hydroxy-5Z,8Z,12E,14Z-eicosatetraenoic acid; 11(R)-HETE
11(R)-HEDE (100 ug)11R-hydroxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11(R)-HEDE
Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Solid Plate (5 ea)Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Solid Plate
Leukotriene B4 Phycoerythrin Tracer (1 ea)LTB4-Phycoerythrin Tracer; Leukotriene B4 Phycoerythrin Tracer
6-keto Prostaglandin F1α EIA Antiserum (500 dtn)6-keto Prostaglandin F1α EIA Antiserum
12(S)-HpETE (100 ug)12S-hydroperoxy-5Z,8Z,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 12(S)-HpETE
Interleukin-1α (human) AChE-FAb’ Conjugate (500 dtn)Interleukin-1α (human) AChE-FAb’ Conjugate
PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent (5 ea)PPARγ (human recombinant); PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent
Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4) (1 L)TE Buffer; Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4)
3-Methylcholanthrene Positive Control (40 ul)3-Methylcholanthrene Positive Control
D-myo-Inositol-1,3,4,5-tetraphosphate (sodium salt) (500 ug)D-myo-inositol-1,3,4,5-tetrakis(dihydrogen phosphate), octasodium salt; Ins(1,3,4,5)-P4|1,3,4,5-IP4; D-myo-Inositol-1,3,4,5-tetraphosphate (sodium salt)
Fumonisin B1 (10 mg)1,2,3-propanetricarboxylic acid, 1,-1’-[1-(12-amino-4,9,11-trihydroxy-2-methyltridecyl)-2-(1-methylpentyl)-1,2-ethanediyl] ester; Fumonisin B1
PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (1 mg)1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-5-phosphate, diammonium salt; DPPI-5-P1; PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt)
G6PDH Fluorometric Detector (1 ea)G6PDH Fluorometric Detector
SPHK Assay ADP (1 ea)SPHK ADP; SPHK Assay ADP130866-100WST-1 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒100 次
70503Y-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-5000 bp)50 次
生物素化的 β- 半乳糖苷酶100U
電泳溴酚藍(lán)溶液10mL
變色硅膠50g
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL
CAS9001-60-9L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )2.5ku
130531-1組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑1mL
柱式分枝桿菌 DNAout50 次
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×1.5mL
AICAR(AMPK 激活劑 )5mg
Rhod-2,三鹽1mg
DNA CTAB 溶液,20%100mL
22-0590-25TMRE25mg
101111-50柱式軟體動(dòng)物 DNAout50 次
青鏈溶液100mL
哺乳動(dòng)物雙雜交試劑盒20 μg
三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) 1.5mL
兔抗 GST 標(biāo)簽多抗20μL
120918-200人血液和骨髓造血干細(xì)胞分離液 1.068-1200mL
81107-*提無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
D- 甘露醇250g
柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
雜交管 (35×100mm)1個(gè)
18-0510-24乳酸脫氫酶測(cè)試盒24 T
100874-1.5DNA 尿素 -PAGE 上樣液1.5mL