詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;Human IgM圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠雜交瘤細(xì)胞;Human IgM圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1957年,Puck TT從成年中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞,CHO-K1是CHO的一個(gè)亞克隆。CHO-K1的生長(zhǎng)需要脯氨酸。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
*熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白50μg
R002-1RNA 分析技術(shù)服務(wù)1次
130698-253´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類(lèi)似物25 OD
胃蛋白酶抑制劑5mg
GAPDH 小鼠單抗30μL
偏釩酸25g
Red-Taq DNA 聚合酶100U
140277-100酸水解酪素100g
130511-10JM110 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
小鼠抗 VSV-G 標(biāo)簽單抗100μL
HRP 穩(wěn)定劑 / 稀釋劑200mL
對(duì)硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
人重組 AP1(c-Jun)50fpu(-)-Blebbistatin (1 mg)1,2,3,3a-tetrahydro-3aS-hydroxy-6-methyl-1-phenyl-4H-Pyrrolo[2,3-b]quinolin-4-one; (S)-Blebbistatin; (-)-Blebbistatin
N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone (25 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-hexadec*; N-palmitoyl-L-Homoserine|C16-HSL; N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone
GW 4869 (hydrochloride hydrate) (1 mg)3,3’-(1,4-phenylene)bis[N-[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]-dihydrochloride-2-propenamide; GW 4869 (hydrochloride hydrate)
M 344 (10 mg)4-(dimethylamino)-N-[7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl]-benzamide; Histone Deacetylase Inhibitor III|MS 344|D237; M 344
3-hexanoyl-NBD Cholesterol (500 ug)6-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadial-4-yl)amino]-cholest-5-en-3-ol; 3-C6-NBD Cholesterol; 3-hexanoyl-NBD Cholesterol
ZLJ-6 (10 mg)2-ami,5-dihydro-1-methyl-5-[[methylsulfonyl)phenyl]methylene]-4H-imidazol-4-one- (methanesulfonate); ZLJ-6
Biotin-NHS (100 mg)6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid; Biotin N-hydroxysuccinimide ester|NSC 345668; Biotin-NHS
Myristic Acid (25 g)tetradecanoic acid; NSC 5028; Myristic Acid
PGDM (100 ug)9α,11β-dihydroxy-15-oxo-13,14-dihydro-2,3,18,19-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; Prostaglandin D Metabolite; PGDM
13,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α (5 mg)9α,11α,15S-trihydroxy-16,16-difluoro-prosta-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-16,16-difluoro PGF2α; 13,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α
Aspalatone (50 mg)2-(acetyloxy)-2-methyl-4-oxo-4H-pyran-3-yl-benzoic acid ester; Acetylsalicylic Acid Matol ester; Aspalatone
CAS59-30-3葉酸5g
140409-20克必隆平末端克隆試劑盒(組成型)20 次
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝30 次