詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;CRYAB價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;CRYAB價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
3-(O-acetyloxime), 5-chloro-1-[(2,5-dichlorophenyl)methyl]-1H-Indole-2,3-dione, C30, LDN 57444LDN-57444
t-Butyl-2-((6S)-4-(4-chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)acetateBromodomain Inhibitor, (+)-JQ1
2,KT5823
2-[(1-Methylpropyl)dithio]-1H-imidazole; IV-2PX 12
5,6,7,8-Tetrahydro-2-(4-methylphenyPifithrin-α, Cyclic, hydrobromide
Hydroxy-2,3-dixopyrrolidine-3-sulfonic acid sodium salt; Sulfo-NHS; SNHS; N-Hydroxysulfosuccinimide sodium saltSulfo-NHS
Amebacilin; Fugilin; Fumidil; Fumadil B; NSC9168; U5762Fumagillin
Mambalgin-1Mambalgin-1
5-Chloro-2-[(E)-2-[phenyl(pyridin-2Jumonji HDM Inhibitor, JIB-04
(1aR,Ingenol
Sodium Pneumocandin A0, 1-((4R,5R)-4,5-dihydroxy-N2-(4-(5-(4-(pentyloxy)phenyl)-3-isoxazolyl)benzoyl]-L-ornithine)-4-((4S)-4-hydroxy-4-(4-hydroxy-3-(sulfooxy)phenyl)-L-threonine)-Micafungin sodium
2-(2’,3-dimethyl-[2,4’-bipyridin]-5-yl)-N-(5-(pyrazin-2-yl)pyridin-2-yl)acetamideLGK974
LY-404187; N-[2-(4’-cyanobiphenyl-4-yl)propyl]propane-2-sulfonamideLY404187
Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail, EZBlockEZBlock Universal Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail
T20 (PBS) Blocking BufferEZBlock T20 (PBS) Blocking Buffer
JNK Negative Control Cell LysateJNK Negative Control Cell Lysate
EZSolution Ionomycin free acidEZSolution Ionomycin free acid
白藜蘆醇Resveratrol
海藻糖Trehalose dihydrate
CAS83382-89-2QAE 葡聚糖凝膠 A-5025g
130566-1000α-Actin 小鼠單抗1000μL
80403-1RNase-free 水1mL
P- 硝基苯基磷酸膽堿100mg
cDNA 克隆系列5 μg
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次
磁珠植物 DNAout50 次
D020-1PCR- 單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測技術(shù)服務(wù)一塊膠
80701-10TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗1000μL
即用型長片段 PCR 試劑盒20 次
N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖5g
HinfI 2000U
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg
23-0130-5Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )5mg
130501-1.5柱式內(nèi)毒素清除劑1.5mL
軟骨 RNAout50 次
DNA 稀釋液10mL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次
可逆性銅染試劑盒1套
CAS1239-45-8溴化乙錠 (EB)100mg
100929-50細(xì)菌膜蛋白質(zhì)微量提取試劑盒50 次
Zetterqvist 固定液250 mL
鏈霉蛋白酶 E250mg
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝長尖 )96 支