詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;Calcyclin價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;Calcyclin價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Prostaglandin Screening Library III (96-Well) (50 ul)Prostaglandin Compound Screening Library 3
(±)-Clopidogrel (hydrochloride) (10 mg)α-(2-chlorophenyl)-6,7-dihydro-methyl ester-thieno[3,2-c]pyridine-5(4H)-acetic acid; (±)-Clopidogrel (hydrochloride)
(±)16-HDoHE (25 ug)(±)16-hydroxy-4Z,7Z,10Z,13Z,17E,19Z-docosahexaenoic acid; 16-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)16-HDoHE
(±)5,6-DHET (25 ug)(±)5,6-dihydroxy-8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; (±)5,6-DiHETrE; (±)5,6-DHET
Ketamine (hydrochloride) (50 mg)CI-581; 2-
Rotenone (10 g)NSC 26258|NSC 8505|Nicouline|Tubatoxin; (2R,6aS,12aS)-1,2,12,12a-tetrahydro-8,9-dimethoxy-2-(1-methylethenyl)-[1]benzopyrano[3,4-b]furo[2,3-h][1]benzopyran-6(6aH)-one
SGC-CBP30 (5 mg)2-[2-(3-chloro-4-methoxyphenyl)ethyl]-5-(3,5-dimethyl-4-isoxazolyl)-1-[(2S)-2-(4-morpholinyl)propyl]-1H-benzimidazole
BAY-11-7085 (50 mg)3-[[4-(1,1-dimethylethyl)phenyl]sulfonyl]-2E-propenenitrile
Desomorphine (5 mg)d; 4,5α-epoxy-17-methyl-morphinan-3-ol
Atglistatin (1 mg)N’-
Ginsenoside Rg3 (5 mg)12β,20-dihydroxydammar-24-en-3β-yl 2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranoside
BQCA (5 mg)1,
Apixaban (1 mg)BMS 562247-01|Eliquis; 4,5,6,7-tetrahydro-1-(4-methoxyphenyl)-7-oxo-6-[4-(2-oxo-1-piperidinyl)phenyl]-1H-pyrazolo[3,4-c]pyridine-3-carboxamide
Zidovudine (100 mg)AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV; 3’-
Kemptide (5 mg)NSC 332190L- 鳥氨酸5g
胃粘膜素100mg
酚 - 混合液 (DNA 提取 )100mL
CAS56-45-1L- 絲氨酸10g
100908A-30一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)30 次
柱式植物油 DNAout50 次
硫酸新干粉1g
核糖核酸酶 T1100KU
GSH 和 GSSG 試劑盒共 100 次
CAS9035-75-0糜蛋白酶原1 g
131149-100山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記100μL
80902-5大提柱式血液 RNAout5次
N- 氨基甲酰甲基乙磺酸5g
4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚二鹽10mg
平滑肌細(xì)胞生長因子 ( 不含血清 )5mL
電泳丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )200mL
21-0290-5 乳上皮細(xì)胞生長因子5mL
80933-100RNase-free Tris HCl,1M,pH 9.0100mL
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
BCECF AM1mg
L-Citrulline(NO 中間體 )1g
親和層析柱6 mL
23-0410-0.5Lipoic acid( 抗氧化劑 )0.5g
130510-50磁珠植物 DNAout50 次