詳細(xì)介紹
小鼠肉瘤細(xì)胞;CCRF S-180*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
小鼠肉瘤細(xì)胞;CCRF S-180*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 S-180細(xì)胞建于1959年(Foleg,G,et al)。該細(xì)胞系保持了肉瘤的腫瘤原性,可用于腫瘤發(fā)生機(jī)理的體內(nèi)外研究。在體外,廣泛用于腫瘤花療法的篩選試驗(yàn)(Cancer chemotherapy screening test)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C98
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
* (hydrochloride) (10 mg)4-FF|NIH 10491|p-FF; N-(4-fluorophenyl)-N-[1-(2-phenylethyl)-4-piperidinyl]-prop*, monohydrochloride
Paliperidone (500 mg)9-hydroxy Risperidone; 3-[2-[4-(6-fluoro-1,2-benzisoxazol-3-yl)-1-piperidinyl]ethyl]-6,7,8,9-tetrahydro-9-hydroxy-2-methyl-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one
2-Chloroadenosine (50 mg)Antibiotic AT-265B|CADO|NSC 36896; 2-
BZP (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)1-Benzylpiperazine; 1-(phenylmethyl)-piperazine, dihydrochloride
epi-Testosterone (5 mg)NSC 26499|iso-Testosterone; 17α-hydroxy-androst-4-en-3-one
MK2 Inhibitor III (1 mg)1,5,6,7-tetrahydro-2-[2-(3-quinolinyl)-4-pyridinyl]-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one, monohydrate
8-bromo-cGMP (sodium salt) (5 mg)8-bromo Guanosine 3’,5’-cyclic monophosphate; 8-bromo-guanosine cyclic 3’,5’-(hydrogen phosphate), monosodium salt
Pentylone (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(methylamino)-1-pentanone, monohydrochloride
N-NANA|Neu5Ac; N-acetyl-neuraminic acid
1-Aminocyclopropanecarboxylic Acid (1 g)ACC|ACPC|NSC 98430; 1-amino-cyclopropanecarboxylic acid
Acetyl Coenzyme A (sodium salt) (25 mg)Acetyl-CoA; S-acetate coenzyme A, trisodium salt
Juglone (1 g)5-Hydroxy-1,4-naphthoquinone|NSC 153189|NSC 34266|NSC 622948; 5-hydroxy-1,4-naphthalenedione
Kobe 0065 (1 mg)N-
VU0364439 (1 mg)N-
α-Hydroxyglutaric Acid (sodium salt) (25 mg)2-HG|2-Hydroxyglutaric Acid; 2-hydroxy-pentanedioic acid, disodium salt
CUDC-101 (50 mg)7-[[4-[(3-ethynylphenyl)amino]-7-methoxy-6-quinazolinyl]oxy]-N-hydroxy-hept*
ZilpaterolRU-42173|Zilmax; (6R,7R)-rel-4,5,6,7-tetrahydro-7-hydroxy-6-[(1-methylethyl)amino]-imidazo[4,5,1-jk][1]benzazepin-2(1H)-one裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒 ( 含轉(zhuǎn)化液 )20 次
131247-2504% 多聚甲醛 (RNA )250 mL
3073-50一管式病毒 RNAout50 次
尼龍膜,13×20cm1張
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )1次
DiBAC4(3)25mg
D-Hanks 溶液100mL
22-0240-10DiI( 細(xì)胞膜紅色熒光探針 )10mg
120658B-1陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)1個
葡聚糖凝膠 G-1025g
包涵體微量純化試劑盒20 次
Tocopherol( 抗氧化劑 )2g
S1 核酸酶5000U
23-0810-1U0126(MEK1/2 抑制劑 )1mg
130950-10Southern 細(xì)菌 (G-)DNAout10 次
RNase-free 異硫氰酸胍溶液 ,5M100mL
超微量 ATP 酶測試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)25 T
DNA UV 防護(hù)劑3g
血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次
18-0180-25超微量 ATP 酶測試盒 ( 可測總 ATPase)25 T
101215-100DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)100g
SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pUC19/MspI50 次
柱式凝固血液 DNAout50 次