小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F1圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  B16-F1是B16-F0的亞系。  
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C27
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

α-Piperidinobutiophenone （hydrochloride） （5 mg）1-phenyl-2-（1-piperidinyl）-1-butanone， monohydrochloride； α-Piperidinobutiophenone （hydrochloride）
Rasagiline （100 mg）（1R）-2，3-dihydro-N-2-propyn-1-yl-1H-inden-1-amine； Azilect ； Rasagiline
4-hydroxy Hexenal （10 mg）（±）-4-hydroxy-2E-hexenal； 4-HHE； 4-hydroxy Hexenal
MK 0524 （1 mg）Laropiprant； （3R）
Prostaglandin Screening Library II （96-Well） （50 ul）Prostaglandin Compound Screening Library 2
（±）-epi CP 47，497 （solution） （5 mg）rel-2[（1S，3S）-3-hydroxycyclohexyl）]-5-（2-methyloctan-2-yl）phenol； 3-trans CP 47，497； （±）-epi CP 47，497 （solution）
（±）17-HDoHE （25 ug）（±）17-hydroxy-4Z，7Z，10Z，13Z，15E，19Z-docosahexaenoic acid； 17-hydroxy Docosahexaenoic Acid； （±）17-HDoHE
（±）5，6-DHET lactone （25 ug）（±）5，6-dihydroxy-8Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid， 1，5-lactone； （±）5，6-DiHETrE lactone； （±）5，6-DHET lactone
Ketamine （hydrochloride） （10 mg）CI-581； 2-
（+）-Methamphetamine （hydrochloride） （50 mg）（+）-Methylamphetamine|NSC 169505|d-Desoxyephedrine|d-Methamphetamine； N,
2C-TFM （hydrochloride） （5 mg）2C-CF3； 2,5-dimethoxy-4-（trifluoromethyl）-benzeneethanamine, monohydrochloride
3-oxo Stearic Acid （100 ug）3-oxo Octadecanoic Acid|β-keto Stearic Acid； 3-oxo-octadecanoic acid
Zinquin ethyl ester （1 mg）2-[[2-methyl-8-[[（4-methylphenyl）sulfonyl]amino]-6-quinolinyl]oxy]-acetic acid, ethyl ester
AB-FUBINACA-d4 （1 mg）N-[（1S）-1-（aminocarbonyl）-2-methylpropyl]-1-[（4-fluorophenyl）methyl]-4,5,6,7-d4-1H-indazole-3-carboxamide
JIB-04 （10 mg）JHDM Inhibitor VII|NSC 693627； （E,E）-2-（5-chloro-2-pyridinyl）hydrazone phenyl-2-pyridinyl-methanone
Heat Shock Protein Inhibitor I （25 mg）HSP Inhibitor I|KNK 437； 3-（1,3-benzodioxol-5-ylmethylene）-2-oxo-1-pyrrolidinecarboxaldehyde
Lamotrigine （10 mg）BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal； 6-Cy3-dCTP 溶液，10mM25μL
CAS59-92-73-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸5g
12-255SURE 菌種1mL
一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
姬姆色素染料1g
固藍(lán) BB 鹽5g
辣根過氧化物酶，偶聯(lián)100mg
CAS133-32-4吲哚 -3- 丁酸1g
131006-100RIPA 裂解液 ( 強(qiáng) )100mL
熒光素標(biāo)記的生物素5mg
聚乙烯亞胺100mL
雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷5g
UTP 溶液，2.5mM2mL
CAS9003-99-0辣根過氧化物酶10mg
131078-5天然蛋白 A1mg
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
L-NAME(eNOS 抑制劑 )200mg
蘋果酸脫氫酶5ku
MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒500 次
CAS64285-73-03,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸1g
130880-1脂蛋白 PAGE 染液1套
β- 氨基1g
M13mp18DNA10μg
吡啰紅 G5g
乳酸測試盒 ( 測全血 )48 T