詳細(xì)介紹
小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0說明書現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細(xì)胞系。它可在體外常規(guī)傳代培養(yǎng),產(chǎn)生高濃度的黑色素??捎糜诜肿由飳W(xué)中黑色素基因的表達(dá)研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C24
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。25E-NBOMe (hydrochloride) (50 mg)2-(4-ethyl-2,5-dimethoxyphenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethan-1-amine, monohydrochloride; 2C-E-NBOMe; 25E-NBOMe (hydrochloride)
SU 9516 (10 mg)1,3-dihydro-3Z-(1H-imidazol-5-ylmethylene)-5-methoxy-2H-indol-2-one; SU 9516
Leflunomide (500 mg)5-methyl-N-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-4-isoxazolecarboxamide; Arava|Avara|HW 486|SU 101; Leflunomide
Nitracaine (5 mg)3-(diethylamino)-2,2-dimethylpropyl 4-nitrobenzoate; Nitracaine
MTEP (hydrochloride) (10 mg)3-[2-(2-methyl-4-thiazolyl)ethynyl]-pyridine, monohydrochloride; MTEP (hydrochloride)
PF-04981517 (5 mg)1-methyl-3-[1-methyl-5-(4-methylphenyl)-1H-pyrazol-4-yl]-4-[(3S)-3-(1-piperidinyl)-1-pyrrolidinyl]-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine; CYP3cide; PF-04981517
ADB-PINACA pentanoic acid metabolite (1 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indazol-1-yl)pentanoic acid; ADB-PINACA pentanoic acid metabolite
1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-PC (1 g)1,2-dimyristoyl-sn-glycerol-3-phosphatidylcholine; 1,2-DMPC|1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-Phosphocholine; 1,2-Dimyristoyl-sn-glycerol-3-PC
(S)-(+)-MT-45 (hydrochloride) (500 ug)(S)-1-cyclohexyl-4-(1,2-diphenylethyl)-piperazine, dihydrochloride; (S)-(+)-MT-45 (hydrochloride)
ML-233 (1 mg)(E)-4-methyl-5-(((phenylsulfonyl)oxy)imino)-[1,1’-bi(cyclohexane)]-3,6-dien-2-one; CID-46905036; ML-233
Dovitinib (5 mg)4-
Guanylate Cyclase α subunit (soluble) Blocking Peptide (200 ug)sGC α-subunit; Guanylate Cyclase α subunit (soluble) Blocking Peptide
S-(2-aminoethyl) Isothiourea (dihydrobromide) (25 g)2-aminoethyl carbamimidothioate, dihydrobromide; Antiradon|NSC 22877; S-(2-aminoethyl) Isothiourea (dihydrobromide)丁基介質(zhì)50mL
紅1g
ATP 溶液,1mM1mL
CAS8002-43-5卵磷脂 ( 大豆 )25g
130535-1APMSF 溶液,10mg/mL1mL
柱式腐殖酸清除劑100 次
Mlu1000U
AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
RNase 抑制劑 ( 人源 )2500U
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次
130653-200GpC 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.CviPI)200U
60906-50cDNA *鏈合成試劑盒50 次
VDAC1 小鼠單抗1000 μL
非凍型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 ) 100mL
葡聚糖凝膠 G-1525g
Hoechst33342 干粉10mg
CAS56-84-8L- 天門冬氨酸25g
90407A-5lambda(λ)DNA5μg
小 RNA 克隆試劑盒10 次
硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )1套
聚乙二醇 6000250g