小鼠雜交瘤細胞；B6y H4圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞；B6y H4圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  該細胞己證明被支原體污染，可作為細胞支原體檢測試驗用陽性對照細胞。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

8-iso Prostaglandin F2β （10 mg）9。beta。，11。alpha。，15S-trihydroxy-（8。beta。）-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 8-iso PGF2β|8-iso-9β-PGF2α|8-epi PGF2β； 8-iso Prostaglandin F2β
15-keto Prostaglandin F2α （10 mg）9α，11α-dihydroxy-15-oxo-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15-keto PGF2α； 15-keto Prostaglandin F2α
15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α （1 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18，19，20-trinor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15-keto-17-phenyl trinor PGF2α； 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α
Prostaglandin H1 （25 ug）9。alpha。，11。alpha。-epidioxy-15S-hydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； PGH1； Prostaglandin H1
Carbocyclic Thromboxane A2 （5 mg）9。alpha。，11。alpha。-methylene-15S-hydroxy-11a-deoxy-11a-methylene-thromba-5Z，13E-dien-1-oic acid； CTA2|Carbocyclic TXA2； Carbocyclic Thromboxane A2
20-trifluoro Leukotriene B4 （50 ug）5S，12R-dihydroxy-20，20，20-trifluoro-6Z，8E，10E，14Z-eicosatetraenoic acid； 20-trifluoro LTB4； 20-trifluoro Leukotriene B4
Thromboxane B2-d4 （500 ug）9α，11，15S-trihydroxy-thromba-5Z，13E-dien-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； TXB2-d4； Thromboxane B2-d4
tetranor-12（R）-HETE （25 ug）8R-hydroxy-4Z，6E，10Z-hexadecatrienoic acid； 8（R）-HHxTrE； tetranor-12（R）-HETE
15-OxoEDE （100 ug）15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE
High-Binding 96-Well Strip Plate （5 ea）High-Binding 96-Well Strip Plate
Cortisol EIA Monoclonal Antibody （100 dtn）Cortisol EIA Monoclonal Antibody
8-Isoprostane AChE Tracer （500 dtn）8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane AChE Tracer131023-100DNA  Triton100mL
噻苯隆25mg
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次
一管式病毒 DNA-RNAout50 次
Turbo 菌種1mL
130430-500E.coli DNA 聚合酶 Ι500U
80202-50柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
梭菌蛋白酶10μg
單細胞裂解液 (RNA)1mL
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
植物 Actin 小鼠單抗30μL
120420-2500核酸外切酶 III2500U
80205-1.5DMSO，PCR 1.5mL
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次
EGY48 酵母感受態(tài)細胞10×100μL
冰袋1個
熒光尺1個
CAS2478-38-8乙酰丁香酮1g
131128H-100無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次
9（S）-HpOTrE （1 mg）9S-hydroperoxy-10E，12Z，15Z-octadecatrienoic acid； 9（S）-HpOTrE
Interleukin-1β （human） EIA Standard （1 ea）Interleukin-1β （human） EIA Standard