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小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞；CT26.WT圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞；CT26.WT圖片
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細(xì)胞株。 它克隆形成的細(xì)胞株命名為CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT，得到致死的亞克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。 即使CT26.CL25表達(dá)了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT2 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α （10 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18，19，20-trinor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15-keto-17-phenyl trinor PGF2α； 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α
Prostaglandin H1 （50 ug）9。alpha。，11。alpha。-epidioxy-15S-hydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； PGH1； Prostaglandin H1
Pinane Thromboxane A2 （500 ug）9。alpha。，11。alpha。-（dimethyl）methylene-15S-hydroxy-11a-deoxy-11a-methylene-thromba-5Z，13E-dien-1-oic； PTA2|Pinane TXA2； Pinane Thromboxane A2
20-trifluoro Leukotriene B4 （100 ug）5S，12R-dihydroxy-20，20，20-trifluoro-6Z，8E，10E，14Z-eicosatetraenoic acid； 20-trifluoro LTB4； 20-trifluoro Leukotriene B4
11-dehydro Thromboxane B2-d4 （25 ug）9。alpha。，15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z，13E-dien-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； 11-keto TXB2-d4； 11-dehydro Thromboxane B2-d4
tetranor-12（R）-HETE （50 ug）8R-hydroxy-4Z，6E，10Z-hexadecatrienoic acid； 8（R）-HHxTrE； tetranor-12（R）-HETE
15-OxoEDE （250 ug）15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE
96-Well Cover Sheet （100 ea）EIA-Well Cover Sheets； 96-Well Cover Sheet
Cortisol EIA Monoclonal Antibody （500 dtn）Cortisol EIA Monoclonal Antibody
8-Isoprostane EIA Antiserum （100 dtn）8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane EIA Antiserum
9（S）-HpOTrE （5 mg）9S-hydroperoxy-10E，12Z，15Z-octadecatrienoic acid； 9（S）-HpOTrE
Interleukin-2 （human） AChE-FAb’ Conjugate （100 dtn）Interleukin-2 （human） AChE-FAb’ Conjugate
Cell-Based Assay 6-methoxy-2-Naphthaldehyde Standard （5 ea）CBA 6-methoxy-2-Naphthaldehyde Standard； Cell-Based Assay 6-methoxy-2-Naphthaldehyde Standard克必隆 G 載體2μg
細(xì)胞色素 C100mg
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含動(dòng)物成分5mL
DNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
140629-20雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）20 次
120654C-20Southern Marker DL2000( 生物素 )20 次
石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒50 次
動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DEAE 葡聚糖凝膠 A-2525g
彈性蛋白酶5mg
CAS9032-75-1離析酶 R-101g
100836-1亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL1mL
柱式內(nèi)毒素清除劑1.5mL
MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500 次
ATP 酶測(cè)試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 )50 T
一管式病毒 DNAout200 次
Rosetta(DE3) 菌種1mL
130660-10ATP 硫酸化酶10U
130921-50兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq)50 次