小鼠肥大細胞瘤細胞；P815圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠肥大細胞瘤細胞；P815圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  P815細胞吞噬小粒乳汁但不吞噬酵母聚糖或卡介苗。 沒有抗體依賴的細胞毒作用。 硫酸右旋糖苷、LPS或PPD不能抑制細胞生長。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。  
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  胎牛血清，10%
傳代方法  1:3。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Ac-Leu-Leu-Met-H - ALLMAc-Leu-Leu-Met-H - ALLM
DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 6-8 kDaDiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 6-8 kDa
nNOS Positive Control (1 ea)nNOS Positive Control
D-myo-Inositol-2,3,5-triphosphate -ammonium salt) (5 mg)Ins(2,3,5)P3 (ammonium salt)|2,3,5-IP3 (ammonium salt), D-myo-Inositol-2,3,5-triphosphate -ammonium salt), D-myo-inositol-2,3,5-tris(dihydrogen phosphate), triammonium salt
phytanoyl-Coenzyme A -triethylammonium salt) (5 mg)Phytanic Acid Coenzyme A Ester (triethylammonium salt)|phytanoyl-CoA (triethylammonium salt), phytanoyl-Coenzyme A -triethylammonium salt)
 (5 mg)KM-X1, , (1-pentyl-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)-methanone
Prostaglandin F2β -tromethamine salt) (50 mg)PGF2β (tromethamine salt)|9β-PGF2α (tromethamine salt), Prostaglandin F2β -tromethamine salt), 9.beta.,11.alpha.,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, tris(hydroxymethyl)aminomethane salt
GLP (human recombinant) Assay Enzyme (25 ul)GLP
KN-92 (hydrochloride) (25 mg)KN-92, 2-[N-(4-Methoxybenzenesulfonyl)]amino-N-(4-chlorocinnamyl)-N-methylbenzylamine, monohydrochloride
氯化膽堿（500GM）Choline Chloride， CAS# 67-48-1； ≥98%
L-甲硫氨酸（500GM）L-Methionine， CAS# 63-68-3； MW 149.21； ≥99%； USP
五水硫酸二氫鉀（2.5KG）Potassium Phosphate Monobasic， Anhydrous， CAS# 7778-77-0； ≥99%
七水硫酸鋅（100GM）Zinc Sulfate， 7H2O， CAS# 7446-20-0； ≥99%
活細胞熒光示蹤探針CFSE（CFDA-SE）CFSE [5-（and 6）-Carboxyfluorescein diacetate， succinimidyl ester] Mixed isomers
5-TAMRA[5-羧基四甲基羅丹明] 可標記多肽 5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] Validated for labeling peptides
her 2酸 [TQ2 acid]Tide Quencher 2 acid [TQ2 acid]
EDANS標記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp（EDANS）-OH芐瞇鹽5g
超螺旋 DNA 分子量標準100uL
CAS71-30-7胞嘧啶5g
12-237JM103 菌種1mL
亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒50 次
黃嘌呤氧化酶5u
苔素5g
R- 藻紅蛋白標記親和素1mg
CAS593-84-0異硫氰酸胍25g
120685-1先鋒溶液 ,100mg/mL1mL
乙二醇雙 (2- 氨基乙基 ) 四 (EGTA)5g
酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞制備試劑盒20 次
秋水仙素100mg
ONPG 溶液，10mg/mL10mL
CAS34522-32-2章魚堿25mg
130591-100小鼠抗 SUMO 標簽蛋白單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次
L- 蘇氨酸25g
藍色葡聚糖 20001g
VDAC1 小鼠單抗1000 μL
CAS6132-04-3檸檬酸，二水100g
120641-30一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝30 次
滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL