詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;AE-2價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;AE-2價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 動(dòng)物用純化的人紅細(xì)胞乙酰膽堿脂酶免疫。 脾細(xì)胞與gp2/O-Agl4骨髓瘤細(xì)胞融合。 產(chǎn)生的抗體與人及猴的乙酰膽堿脂酶結(jié)合,但反應(yīng)位點(diǎn)與AE-1(ATCC HB-72)的抗原決定簇不同。 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)短肢畸形(鼠痘)病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Leukotriene C4 (50 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTC4; Leukotriene C4
11-dehydro Thromboxane B2-d4 (100 ug)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 11-keto TXB2-d4; 11-dehydro Thromboxane B2-d4
12(S)-HETE (25 ug)12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 12(S)-HETE
9(R)-HODE (50 ug)9R-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
96-Well Solid Plate (white) (1 ea)96-Well Solid Plate (white)
Cortisol Express AChE Tracer (100 dtn)Cortisol Express AChE Tracer
8-Isoprostane EIA Standard (1 ea)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Standard
13(S)-HpOTrE(γ) (500 ug)13S-hydroperoxy-6Z,9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE(γ)
Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate (1 ea)Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate
Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM) (5 ea)CBA sEH Inhibitor (10 mM); Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM)
Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0) (500 mL)TBE Buffer; Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0)
PAF C-16 (100 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Plaet-activating Factor C-16; PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol (10 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glyceryl ester; 2-AG; 2-Arachidonoyl Glycerol
Oleyl Trifluoromethyl Ketone (10 mg)1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Sodium Phosphate Assay Buffer (10 ml)Sodium Phosphate Assay Buffer
SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent (1 ea)SIRT6 (human recombinant); SIRT6 (human recombinant) Direct Assay ReagentDenhardt 溶液,50×100mL
大提柱式植物 DNAout4次
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U
CAS62625-32-5溴甲酚綠1g
12-213X33 酵母菌種1mL
一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
糖原Ⅱ型1g
MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )500mL
DNA Tris HCl,1M,pH8.5100mL
140624-20雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-PE·7-AAD) 20 次
90602F-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
十二烷基磺酸清除劑25mL
動(dòng)態(tài)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒48 次
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽100g
Sephacryl S-400 基質(zhì)10mL
CAS9001-62-1脂肪酶5g
100539-1胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液,20mg/mL1mL
柱式酵母 DNAout50 次
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)1000U
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白10mg