詳細(xì)介紹
中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 動(dòng)物用小鼠T細(xì)胞(Th1)進(jìn)行免疫接種。 脾細(xì)胞與NS-1骨髓瘤細(xì)胞融合。 在活化的小鼠T細(xì)胞上檢測(cè)到表達(dá)的一個(gè)39KDa抗體蛋白。 1992年五月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體。 其后代通過(guò)BM 細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.05mM β-巰基乙醇
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Cyanine 5。5胺 [相當(dāng)于Cy5。5胺]Cyanine 5。5 amine [equivalent to Cy5。5 amine]
Helix Fluor 575 琥珀酰亞胺酯Helix Fluor 575, succinimidyl ester
磺胺醋酰-KLH偶聯(lián)物[用于ELISA]Sulfacetamide-KLH Conjugate
Ionomycin (calcium salt) (1 mg)11,19R,21S-trihydroxy-4R,6S,8S,12R,14R,18R,20S-heptamethyl-22-[octahydro-5’S-[1R-hydroxyethyl]-2S,5’-dimethyl[2,2’R-bifuran]-5S-yl]-9-oxo-10Z,16E-docosadienoic acid, calcium salt; Ionomycin (calcium salt)
BI6015 (50 mg)2-methyl-1-[(2-methyl-5-nitrophenyl)sulfonyl]-1H-benzimidazole; BI6015
11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2 (10 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-methylene-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11-deoxy-11-methylene PGD2; 11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2
Prostaglandin E1 Alcohol (5 mg)1,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-9-one; 1-hydroxy Prostaglandin E1|PGE1 Alcohol; Prostaglandin E1 Alcohol
romethyl Ketone (hydrochloride) (50 mg)N-[5-ami-(2-chloroacetyl)pentyl]-4-methyl-benzenesulfonamide, monohydrochloride; TLCK|1-Chloro-3-Toxylamide-7-Amino-L-2-Heptanone; Tosyllysine Chloromethyl Ketone (hydrochloride)
trans-Resveratrol-d4 (500 ug)5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol-2,3,5,6-d4; (E)-Resveratrol-d4; trans-Resveratrol-d4
Salermide (10 mg)N-[3-[[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)methylene]amino]phenyl]-a-methyl-benzeneacetamide; Salermide
trans-Zeatin (250 mg)2E-methyl-4-(9H-purin-6-ylamino)-2-buten-1-ol; trans-Zeatin
CAY10598 (1 mg)5-[(3S)-3-hydroxy-4-phenyl-1-buten-1-yl]1-[6-(2H-tetrazol-5R-yl)hexyl]-2-pyrrolidinone; CAY10598
KN-62 (25 mg)4-[(2S)-2-[(5-isoquinolinylsulfonyl)methylamino]-3-oxo-3-(4-phenyl-1-piperazinyl)propyl]phenyl ester, 5-isoquinolinesulfonic acid; KN-62Bradford 法蛋白定量試劑盒100mL
Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
植物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )5次
23-0600-1Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
130992-50玻璃珠法柱式酵母 DNAout50 次
RNase 抑制劑 ( 人源 )400U
超雜交液 A(不含甲酰胺)100mL
鹽酸四環(huán)素干粉1g
環(huán)孢 A 溶液 ,10mg/mL1mL
131185-10ONPG 溶液,10mg/mL10mL
101107-100DNA CTAB 溶液,20%100mL
Southern 植物 DNAout 10 次
DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )100mL
柱式真菌 DNAout50 次
ER2566 菌種1mL
中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]圖片130410-7克必隆 eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒7次
80919-196 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )1次
水楊酸25g
大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091200mL
TRIzol 伴侶50 次
二氯異香豆素溶液,10mg/mL5mL