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詳細(xì)介紹
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)）；LA1-VAP33-GFP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)）；LA1-VAP33-GFP圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
PPA （5 mg）5-phenyl-4E-pentenol； PPA
L-hydroxy Arginine Acetate （25 mg）N5-[（hydroxyamino）iminomethyl]-L-ornithine， acetate； L-NG-hydroxy Arginine Acetate； L-hydroxy Arginine Acetate
1，4-PBIT （dihydrobromide） （50 mg）S，S’-1，4-phenylene-bis（1，2-ethanediyl）bis-isothiourea， dihydrobromide； 1，4-PBIT （dihydrobromide）
SNAP （50 mg）N-（acetyloxy）-3-nitrosothiovaline； S-Nitroso-N-Acetyl-D，L-Penicillamine； SNAP
Carnosol （5 mg）1，3，4，9，10，10aS-hexahydro-5，6-dihydroxy-1，1-dimethyl-7-isopropyl-2H-9S，4aR-（epoxymethano）phenanthren-12-one； Carnosol
S-Adenosylhomocysteine-d4 （1 mg）S-（5’-deoxyadenosin-5’-yl）-L-homocysteine-d4； SAH-d4； S-Adenosylhomocysteine-d4
Stearoyl Serotonin （1 mg）N-[2-（5-hydroxy-1H-indol-3-yl）ethyl]-octadec*； Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine （5 mg）1-（2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl）-1H-imidazo[4，5-c]pyridin-4-amine； c3dA； 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
PD 166326 （1 mg）6-（2，6-dichlorophenyl）-2-[[3-（hydroxymethyl）phenyl]amino]-8-methyl-pyrido[2，3-d]pyrimidin-7（8H）-one； PD 166326
AM2201 N-（2-fluoropentyl） isomer （1 mg）（1-（2-fluoropentyl）-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanone； AM2201 N-（2-fluoropentyl） isomer
JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer （1 mg）（5-methoxynaphthalen-1-yl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer
Nor*-d3 （5 mg）N-[4-（methoxy-d3-methyl）-4-piperidinyl]-N-phenyl-prop*； R 30451-d3； Nor*-d3人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肌酐(Cr)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人非小細(xì)胞肺抗原(LTA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人蛋白Z(Protein Z)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人布氏菌（Brucellosis）抗體ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白細(xì)胞介素-2 受體（IL-2R）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人γ肽(Pγ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人S蛋白100P（S-100P） ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人B因子(BF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛α乳清蛋白(α-La)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞卵黃高磷蛋白磷酸肽（PPP）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白（TTR）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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