小鼠肝癌瘤株；H22圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠肝癌瘤株；H22圖片
形態(tài)特性  實體瘤、腹水瘤
生長特性 體內(nèi)生長
特征特性  1952年，前蘇聯(lián)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所以C3HA小鼠誘發(fā)的H22肝癌實體瘤的瘤細胞懸液，昆明種小鼠皮下移植后，轉(zhuǎn)腹水瘤。經(jīng)檢測，該瘤株在Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠體內(nèi)可以形成實體瘤和腹水瘤。 
培養(yǎng)條件   -
傳代方法  制備成細胞懸液接種至615等小鼠。
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  -
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

lambda(λ)DNA5μg
丁酰膽堿酯酶500U
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD） 20 次
CAS98185-20-7S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石25mg
100830-30低 pH 緩沖液套裝30 次
組蛋白 3.1 小鼠單抗1000μL
氯化膽堿100g
多聚半乳糖醛1g
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )250 T
CAS9025-82-5磷酸二酯酶Ⅰ100U
140646-100魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
60305-250真菌 RNAout250 次
NotI150U
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg
一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次
22-0070-0.2Actin-Tracker Green( 微絲綠色熒光探針 )0.2mL
17-012-9610 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )96 支
胚胎裂解液1mL
Bst DNA 聚合酶，全長500U
PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg
血液保存和 DNA 純化套裝100 次
23-0650-1SB203580(p38MAPK 抑制劑 )1mg
80803-50柱式動物線粒體 DNAout，PCR 50 次人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D（MICD）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰多肽(PP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2) ELISA試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
人維生素B6(VB6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人內(nèi)皮素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人黃曲酶毒素（AFT）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人庚型肝炎毒IgM(HGV-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人補體因子H(CFH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝