詳細介紹
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%HS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
23-0390-10Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg
3672-50植物 DNAout50 次
RNA CTAB ( 十六烷基*基溴化銨 )100g
Cre 重組酶50U
dNTP 溶液,100mM 0.5mL
0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個
130596-200熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒200 次
130514-2硅基磁珠2mL
SG1117 菌種1mL
DH10B 感受態(tài)細胞0.1 mL×10
DNA 快速連接試劑盒100 次
GAL 指示劑培養(yǎng)基100mL
CAS596-09-8二熒光素1g
140653-1親和層析柱50 mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
2.0 mL RNase-free 離心管500 支
Cycloheximide50mg
Southern Marker Oligo(DIG)20 次
130301-150天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒150 次
120674-50酪蛋白50g
人腮腺炎毒IgG ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人葡萄糖激酶調節(jié)蛋白(GKRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人淋巴細胞功能相關抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人紅細胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人多肽YY(Peptide-YY)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人單純皰疹毒(HSV)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)圖片人補體3裂解產物(C3SP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素受體相關激酶(IRAK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β內啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬瘤壞死因子α (TNF-α)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝