詳細(xì)介紹
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW48價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW48價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 1971-1975年間,A. Leibovitz從結(jié)腸腺癌中分離建立十個(gè)細(xì)胞系,SW48為為其中之一。該細(xì)胞合成癌胚抗原,能在裸鼠中成瘤。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
環(huán)氧基磁珠2mL
D025-1環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)服務(wù)一個(gè)基因
121004-10Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
小鼠抗 S1 標(biāo)簽單抗100μL
甲苯胺藍(lán)5g
β- 環(huán)狀糊精5g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )96 支
干粉型 SOC 培養(yǎng)基250g
23-0210-50Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg
51203-1.5非酶 RNA 清除劑 1.01.5mL
SB203580(p38MAPK 抑制劑 )1mg
DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒20 次
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒100 次
糖蛋白蛋白純化試劑盒50 次
CAS16423-68-0赤蘚紅 B 二鹽5g
131205-10WGA 糖蛋白分離試劑盒10 次
增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒100mL
鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL
1400W(iNOS 抑制劑 )2mg
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL
18-0730-100總谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒100 次
100809-100SSPE 溶液 ,20×100mL小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠乳頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2/CXCL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
山羊血小板衍化生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒組裝/原裝
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乙型肝炎病毒前S1抗體(HBV preS1Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血纖蛋白(Fibrin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胃抑素(GIP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肽聚糖識(shí)別蛋白(PGRP-S)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人去甲腎上腺素(NA) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝