詳細(xì)介紹
人急性淋巴白血病細(xì)胞;Kasumi-1*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人急性淋巴白血病細(xì)胞;Kasumi-1*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院免疫系龔非力教授交換保藏。Kasumi-1細(xì)胞且有人急性淋巴白血病細(xì)胞的典型特征,是研究人急性淋巴白血病的材料。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
CAS75621-03-3CHAPS1g
140383-10EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
新生250mg
核酸內(nèi)切酶 V250U
二硫蘇糖醇 (DTT)5g
十二烷基磺酸清除劑25mL
CAS108321-42-2遺傳100mg
100602-250干粉型 LB 培養(yǎng)基250g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次
間充質(zhì)干細(xì)胞脂防細(xì)胞分化生長因子5mL
β- 乙醇100mL
魯米諾1g
CAS7220-79-3次(亞)甲基蘭10g
120705-5L- 谷胱甘肽 ( 還原型 )5g
支鏈淀粉1g
苦杏仁苷1g
磷酸二氫250g
EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS50-69-1D- 核糖5g
131052-10β- 乙醇,蛋白10mL
柱式土壤 RNAout50 次
磷酸二酯酶Ⅱ10U
CN/DAB 底物套裝 1套CAS75621-03-3CHAPS1g
140383-10EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
新生250mg
核酸內(nèi)切酶 V250U
二硫蘇糖醇 (DTT)5g
十二烷基磺酸清除劑25mL
CAS108321-42-2遺傳100mg
100602-250干粉型 LB 培養(yǎng)基250g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次
間充質(zhì)干細(xì)胞脂防細(xì)胞分化生長因子5mL
β- 乙醇100mL
魯米諾1g
CAS7220-79-3次(亞)甲基蘭10g
120705-5L- 谷胱甘肽 ( 還原型 )5g
支鏈淀粉1g
苦杏仁苷1g
磷酸二氫250g
EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS50-69-1D- 核糖5g
131052-10β- 乙醇,蛋白10mL
柱式土壤 RNAout50 次
磷酸二酯酶Ⅱ10U
CN/DAB 底物套裝 1套
糞便 DNAout100 次
糞便 DNAout100 次