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          人黑色瘤細胞系;A375價格

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          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 型號
          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質 經銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2017-01-10 16:28:04瀏覽次數:271

          聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

          產品簡介

          人黑色瘤細胞系;A375價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細介紹

          人黑色瘤細胞系;A375價格質量保證:    
          我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

          人黑色瘤細胞系;A375價格操作步驟:

          1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
          2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
          細胞名稱
          形態(tài)特性  成纖維細胞樣
          生長特性 貼壁生長
          特征特性  該細胞源于一位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織,由Giard DJ建系。其染色體為超三倍體,帶有62條染色體。其中九條標志染色體普遍存在于A375細胞中,而普通染色體N2, N6和N22在細胞中只有一條。該細胞是與中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞中心交換并保藏。 
          培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
          傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
          傳代情況 C165
          凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測 陰性
          STR  STR鑒定
          同工酶 
          染色體 
          使用權限 A類
          細胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
          1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
          二、細胞處理:
          1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
          2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

          固綠5g
          接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
          CAS9004-54-0葡聚糖 T-200010g
          12-131Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種1mL
          液相內毒素清除劑500 次
          JM109(DE3) 菌種1mL
          L- 阿拉伯糖10g
          DNA 包被溶液100mL
          CAS636-00-06- 羥基多巴胺5g
          120701-10鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL
          吲哚 -3- 1g
          聚乙二醇 6000250g
          二硫赤蘚醇1g
          DNA 探針變性液10mL
          CAS113-98-4青 G 鹽1Mu
          90610-1卵白蛋白標準品,2mg/mL1mL
          重組蛋白 A/G1mg
          LBA4404 農桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
          葡萄糖氧化酶10Ku
          雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 555·7-AAD)20 次
          CAS4197-25-5蘇丹 B5g
          90403-5蛋白膠中量回收試劑盒5次
          α- 乳糖100g小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠卵巢標志物CA125ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
          小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人血吸蟲(schistosoma)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人信號轉導分子(Smad1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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