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          人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP1圖片

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-10 16:23:58瀏覽次數(shù):313

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          人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
          細(xì)胞名稱人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP1圖片
          形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
          生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
          特征特性  該細(xì)胞由華中科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院蘇莉教授提交保藏,可用于相關(guān)的基礎(chǔ)研究。 
          培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
          傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
          傳代情況 C21
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測(cè) 陰性
          STR 
          同工酶 同工酶鑒定
          染色體 
          使用權(quán)限 A類
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          CAS156-54-7丁酸1g
          70602-30DNA 快速連接試劑盒30 次
          一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
          克必隆 eTS 核心試劑盒10 次
          可溶性淀粉100g
          成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
          DNA  DTT( 二硫代蘇糖醇 )10g
          140625-50雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 50 次
          90602I-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次
          十六烷基*基溴化銨25g
          動(dòng)物 DNAout250mL
          對(duì)氨基苯磺酸25g
          DNA  Triton100mL
          CAS657-27-2L- 賴氨25g
          100837-10EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白10mL
          柱式昆蟲 mtDNAout,測(cè)序10 次
          Monobromobimane [mBBR]25mg
          ATP 檢測(cè)試劑盒200 次 
          血液 DNAout150 次
          液體樣品蛋白純化回收試劑盒50 次
          130657-250無機(jī)焦磷酸酶,熱穩(wěn)定250U
          131227-510nt 隨機(jī)引物,0.5μg/μL5μg
          Western 印跡膜封膜液 (NC 膜和 PVDF 膜 ) 100mL
          過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )250 T
          剛果紅5g人信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人基膜聚糖(lumican)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人分泌成分(SC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人Clara細(xì)胞分泌蛋白(CC-SP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝

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