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詳細(xì)介紹
人腎腺癌細(xì)胞；ACHN圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人腎腺癌細(xì)胞；ACHN圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 ACHN細(xì)胞系建系于1979年，衍生于一個(gè)患惡性腎癌的22歲男性白人病料。細(xì)胞系在MNM培養(yǎng)液中穩(wěn)定傳代150天，然后大量增殖接種裸鼠，4周后產(chǎn)生明顯的局部浸染性腫瘤。干擾素可抑制該細(xì)胞系增殖，因此，ACHN細(xì)胞可用于人干擾素和干擾素誘導(dǎo)劑的抗細(xì)胞增殖研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；1%NEAA
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C31
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Zinquin 乙酯5mg
β- 瓊脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游離脂肪酸測試盒48 T
80915B-100超雜交液 B（含甲酰胺）100mL
TE 緩沖液，PH7.010mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液100mL
硼氫化氰5g
HRP 標(biāo)記的抗地高抗體10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基惡唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次
即用型 PCR 檢測試劑盒系列50T
氯5g
動物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
CAS146-68-9碘硝基四唑紫嘌呤250mg
90613-100動物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒100 次
魚精蛋白硫1g
Karnovsky 固定液250 mL
L- 鹽酸半胱氨酸25g
Carnoy 固定液250 mL
CAS329-98-6苯甲基磺1g
131077-10組氨酸標(biāo)簽蛋白染色試劑盒10 次
柱式 RNA 純化試劑盒50 次
Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 )50μL雞免疫球蛋白M（IgM）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠心肌肌鈣蛋白Is（cTnI）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
羊促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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