詳細(xì)介紹
人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞;Daudi價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞;Daudi價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 1967年,該細(xì)胞系E. Klein 和 G. Klein建系,源于一名16歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白陰性,表達(dá)EBNA, VCA,sIg。該細(xì)胞攜帶EB病毒,是一個典型的B淋巴母細(xì)胞系,可用于引起白血病機制的研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
21-0250-5 平滑肌細(xì)胞生長因子5mL
60902-100RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0100mL
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g
BAL31 核酸酶50U
Ionomycin( 鈣離子載體 )250nmol
RNA Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )100g
23-0370-20L-Canavanine(iNOS 抑制劑 )20mg
121102-50柱式鼠尾 DNAout50 次
RNA 電泳液 ,10×250mL
COX IV 小鼠單抗1000 μL
dNTP 溶液 ,10mM0.5mL
0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個
140630-20細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 594)20 次
60606-500硅膠膜離心吸附柱再生液500 次
Sephacryl S-400 基質(zhì)10mL
糞便 DNAout30 次
α- 酮戊二酸5g
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
CAS17629-30-0D- 棉子糖10g
130567-30β-Tubulin 小鼠單抗30μL
80403-10RNase-free 水10mL
p19miRNA 檢測試劑盒 50 次豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
羊雌三醇(E3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒試劑盒組裝/原裝
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠過氧化氫酶(CAT)ELISA 試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
山羊雌三醇(E3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血清素/血清胺(ST)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝