詳細(xì)介紹
人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取自人絨癌腦轉(zhuǎn)移組織,在倉鼠頰囊移植傳代8年。利用移植瘤組織進(jìn)行體外培養(yǎng),建立細(xì)胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系,JEG-3是其衍生克隆。該細(xì)胞可以產(chǎn)生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盤催乳素、角蛋白。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C195
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
CAS5704-04-1N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸10g
131108-1ONPG 干粉1g
β-D- 阿糖胞苷50mg
MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )100mg
1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷5g
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測試盒 ( 比色法 )50 T
酸洗玻璃珠系列10g
131288-250Maximov 固定液250 mL
81103-25一站式真菌 mRNAout25 次
檸檬酸 ( 無水 )100g
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
Indo-1,五銨鹽1mg
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次
22-0430-10Lucigenin( 光澤精 )10mg
90901-200菌體內(nèi)毒素清除劑200mL
前脂肪細(xì)胞生長因子5mL
丙烯葡聚糖凝膠 S-300 HR150mL
血液 RNAout 250 次
Xa 因子蛋白酶25μg
120903-200人單核細(xì)胞分離液 1.075200mL
80921-596 孔板病毒 DNAout( 離心法 )5次
RsaI200U
穿刺培養(yǎng)基10 管
一管式植物 DNAout50 次親和硅烷 25mL
離心管 ( 配研磨杵用 ) 50 只
CAS36051-31-75′ - 三磷酸鳥苷三10mg
3080-250植物 RNAout250 次
DiO( 細(xì)胞膜綠色熒光探針 )10mg
XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
無內(nèi)毒素螢火蟲熒光素25mg
鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液,10mg/mL10mL
130958A-10DNA 上樣液 ( 紅 ),6×( 非甘油 )10mL
高 GC DNA 清除劑,PCR 1.5mL
VDAC1 小鼠單抗100 μL
23-0490-100Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )100mg
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L
S1 核酸酶5000U
冷凍型血液 RNA 保存液100mL
一管式病毒 RNAout200 次
120508-0.063腸激酶 ( 輕鏈 )0.063μg
胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液,20mg/mL1mL
4mL DNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個(gè)
DH10Bac 菌種1mL