詳細介紹
人肝癌細胞;Hep 3B2.1-7圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肝癌細胞;Hep 3B2.1-7圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來自8歲男性黑人的組織。 其染色體模式數(shù)目為60,在裸鼠中能致瘤。 已知該細胞系含有與人類疾病有關的因子,需在2級生物安全防護下操作。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(154+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:8;D13S317:12,14;D16S539:10;D18S51:20;D19S433:12.2,14;D21S11:30,31;D2S1338:21,25;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:8,10;D8S1179:12;FGA:18;TH01:6,7;TPOX:9;vWA:17
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
101215-100DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)100g
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL10mL
T1 感受態(tài)細胞10×100μL
CAS65637-73-2QAE 葡聚糖凝膠 A-25100g
CAS6892-68-8二硫赤蘚醇1g
131233-20克必隆零背景 T 載體20 次
L-Citrulline(NO 中間體 )1g
SP600125(JNK 抑制劑 )5mg
130676-200Dicer(RNase III)200U
一站式動物 mRNAout25 次
動物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )15 次
DAPI 干粉10mg
親和硅烷 25mL
CAS10034-93-2硫酸肼25g
51102-100細菌 RNAout100 次大鼠腸上細胞*培養(yǎng)基100mL
MGC803全細胞裂解液100ug100uggersion
Bacterial Protein Extration Kit/細菌蛋白抽提試劑盒25次、100次國產(chǎn)
苯丙氨酸脫羧酶培養(yǎng)基/苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基/Phenylalanine Deaminase Medium用于細菌苯丙氨酸脫羧酶試驗100克國產(chǎn)/進口
小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國產(chǎn)/進口
NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成骨細胞*培養(yǎng)基100mL
人膽管細胞型肝細胞英文名稱:HCCC-9810
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基/硝酸鹽胨水培養(yǎng)基/Nitrate Peptone Medium綠膿桿菌硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗250克國產(chǎn)/進口
Primary Antibody Diluent/一抗稀釋液(綠色)20ml國產(chǎn)gersion
SCaBER(人膀胱鱗細胞)5×106cells/瓶×2
甘氨酸500g國產(chǎn)
骨肉瘤英文名稱:HOS
氯化鈉血瓊脂基礎/Sodium Chloride Blood Agar Base副溶血性弧菌的溶血試驗250克國產(chǎn)/進口
VE(人血管內(nèi)細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H226(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-436(人腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
BxPC-3(人原位胰腺腺細胞)5×106cells/瓶×2
BC-019(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
苞肉牛肉粒/Dried Meat Particle加入苞肉基礎中配成苞肉培養(yǎng)基100克國產(chǎn)/進口
硝酸鹽氰化培養(yǎng)基基礎/KCN培養(yǎng)基基礎/Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細菌KCN抑制試驗100克國產(chǎn)/進口
NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成年表角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基100mL
DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)50 次
dITP 溶液,100mM0.5mL
23-0300-1H-89(PKA 抑制劑 )1mg
120201-25超敏化學發(fā)光 (HRP) 檢測試劑盒(ECL)25mL
121002-10綠如蘭核酸染料 ( 可見光型 )10mL
谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶1mg
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 50 次
23-0660-10Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )10mg