詳細(xì)介紹
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 SW620是從一個(gè)51歲男性白人組織中分離得到。 由A.Leibovitz等從一個(gè)淋巴結(jié)建株。 細(xì)胞系主要由無絨毛的小園球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成。 它僅合成少量癌胚抗原(CEA)且在裸鼠中有高度的致瘤性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:17,24;D3S1358:16;D5S818:13;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
120405-25堿性磷酸酶,大腸桿菌25U
80912-*提柱式質(zhì)粒 DNAout 10 次
F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )500mL
分子生物學(xué)糖原溶液,10mg/mL1mL
21-0430-5支氣道上皮細(xì)胞生長因子5mL
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4
CHAPS1g
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )100 支
MM4-64(FM?4-64)1mg
131210-10000耐熱型 MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)10000U
亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒50 次
果膠酶 Y-23100mg
即用型封堵液 (NC ) 50mL
131049-100十二烷基磺酸100g
12-265EBY100 酵母菌種1mL
γ- 環(huán)狀糊精25mg
磁珠血液 DNAout50 次人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:HS683
大鼠表角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2gersion
B16-F10(小鼠膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
丙二酸鈉培養(yǎng)基/丙二酸鹽培養(yǎng)基/Malonate Broth用于測定腸道細(xì)菌對丙二酸鹽的利用試驗(yàn)10克國產(chǎn)/進(jìn)口
溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基/Cetrimide Agar Medium綠膿桿菌的分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸巨噬細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人大細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H460
SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
Hs 746T(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PBS規(guī)格:500ml
解脲支原體快速培養(yǎng)基/溶脲支原體快速培養(yǎng)基/UU培養(yǎng)基/UU MediumBR1支國產(chǎn)/進(jìn)口
SP Rabbit HRP Kit/兔Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)
293FT(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞英文名稱:BHK-21
SV-HUC-1(人膀胱上永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
胰胨大豆瓊脂斜面/TSA/Tryptic Soy Agar培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
Ni-Agarose His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒5ml、2ml國產(chǎn)gersion
MDA-MB-231(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小 RNA 克隆試劑盒10 次
130586-100小鼠抗 HSV 標(biāo)簽單抗100μL
PLPD 固定液250 mL
液體樣品 RNAout50 次
一步離心式石蠟清除劑100 次
克必隆零背景 T 載體20 次